| Registro completo |
| Provedor de dados: |
195
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| País: |
Brazil
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| Título: |
Padronização e validação do método de vírus, neutralização para quantificação de anticorpos contra febre aftosa
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| Autores: |
Pereira, D. F. S.
Veloso, L. B.
Aquino, C. F.
Xavier, M. A. S.
Mozzer, O. D.
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| Data: |
2016-08-29
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| Ano: |
2016
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| Palavras-chave: |
Febre aftosa
Vírus neutralização
Validação
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| Resumo: |
A febre aftosa (FA) é uma doença causada por vírus do gênero Aphtovirus, pertencente à família Picornaviridae. A vacinação sistemática vem sendo empregada como recurso profilático central dos programas de erradicação da doença. O teste de vírus neutralização (VNT) é uma alternativa para avaliar a potência de vacinas, visto que a proteção à FA está associada à indução de altos níveis séricos de anticorpos neutralizantes. O objetivo deste trabalho foi padronizar e validar o método de VNT, incluindo uma etapa colorimétrica na interpretação dos resultados. Na padronização do método foram utilizados soros de animais vacinados, sorotipos virais O1 Campos, A24 Cruzeiro e C3 Indaial, os quais foram analisados previamente pelo Instituto Pirbright (Inglaterra). Foram utilizadas as linhagens celulares BHK-21 e IB-RS-2. Os soros foram diluídos em microplacas e em seguida 100 TCID50 de suspensão viral foram adicionados a cada cavidade. As placas foram incubadas a 37ºC em estufa com 5% de CO2 durante uma hora e, em seguida, foi adicionada a suspensão celular na concentração de 106 células/mL. As microplacas foram incubadas durante 48 horas. Os títulos foram calculados conforme Spearman & Kärber e expressos em log (TCID50/mL). A média do título (n=18) obtida para o sorotipo A24 Cruzeiro em BHK-21 foi de 5,27 ± 0,52, enquanto a média (n=18) para IB-RS-2 foi de 7,43 ± 0,30. As leituras do sorotipo A24 Cruzeiro em IB-RS-2 foram: 7,26; 7,20 e 7,43 (TCID50/mL), para leitura em microscópio óptico sem coloração, corada com azul de metileno e com vermelho neutro, respectivamente. O coeficiente de correlação de Pearson entre os resultados do VNT padronizado por esse estudo e os resultados do Instituto Pirbright foi de 0,96 para o sorotipo O1 Campos, 0,96 para A24 Cruzeiro e 0,95 para C3 Indaial. Após a padronização, o método foi validado com a determinação dos parâmetros de precisão, exatidão, estabilidade, linearidade e robustez. O teste de vírus neutralização em células IB-RS-2, com etapa de coloração com vermelho neutro e leitura em leitor de microplacas foi aprovado quanto à precisão, exatidão, estabilidade, linearidade e robustez do método. Conclui-se que o método validado atende às exigências das aplicações analíticas de modo a assegurar a confiabilidade dos resultados, sendo adequado para quantificação de anticorpos neutralizantes e, portanto, podendo ser utilizado para a avaliação da potência de vacinas contra febre aftosa. Suporte: o projeto foi financiado pela Vallée S/A.
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| Tipo: |
Info:eu-repo/semantics/article
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| Idioma: |
Português
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| Identificador: |
http://www.revistamvez-crmvsp.com.br/index.php/recmvz/article/view/32020
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| Editor: |
Conselho Regional de Medicina Veterinária e Zootecnia do Estado de São Paulo
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| Relação: |
http://www.revistamvez-crmvsp.com.br/index.php/recmvz/article/view/32020/35560
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| Formato: |
application/pdf
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| Fonte: |
Revista de Educação Continuada em Medicina Veterinária e Zootecnia; Revista de Educação Continuada em Medicina Veterinária e Zootecnia do CRMV-SP, v. 14, n. 2 (2016); 76-76
Revista de Educação Continuada em Medicina Veterinária e Zootecnia; Revista de Educação Continuada em Medicina Veterinária e Zootecnia do CRMV-SP, v. 14, n. 2 (2016); 76-76
Revista de Educação Continuada em Medicina Veterinária e Zootecnia do CRMV-SP; Revista de Educação Continuada em Medicina Veterinária e Zootecnia do CRMV-SP, v. 14, n. 2 (2016); 76-76
2596-1306
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| Direitos: |
Direitos autorais 2016 Revista de Educação Continuada em Medicina Veterinária e Zootecnia
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