| Registro completo |
| Provedor de dados: |
Acta biol.Colomb.
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| País: |
Colombia
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| Título: |
EVALUACIÓN DE DOS MÉTODOS DE EXTRACCIÓN DE ADN A PARTIR DE BIOPSIAS FIJADAS EN FORMALINA Y EMBEBIDAS EN PARAFINA EN CONDICIONES NO ÓPTIMAS
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| Autores: |
BUSTAMANTE,JAVIER ANDRÉS
ASTUDILLO,MIRYAM
PAZOS,ALVARO JAIRO
BRAVO,LUIS EDUARDO
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| Data: |
2011-08-01
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| Ano: |
2011
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| Palavras-chave: |
Biopsia
Granuloma
Ácidos nucleicos
Fragmentación del ADN
Reacción en cadena de la polimerasa
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| Resumo: |
Los tejidos de archivo son material de incalculable valor para estudios retrospectivos que requieran la aplicación de análisis moleculares. Existen múltiples métodos de extracción de ADN a partir de este tipo de muestras. No obstante, la mayoría de métodos toman mucho tiempo y los reactivos empleados contribuyen a la fragmentación del ADN. Con el objetivo de optimizar dos métodos de extracción de ADN a partir de tejidos embebidos en parafina en condiciones no óptimas, se seleccionaron 47 bloques en parafina que contenían biopsias de pleura, pulmón y pericardio correspondientes a 24 pacientes (66,6% hombres) mayores de 18 años, con inflamación granulomatosa crónica, remitidos al Departamento de Patología, Hospital Universitario del Valle entre 2002 y 2007. Se realizaron 10 cortes a cada muestra y se sometieron a dos métodos de extracción de ADN: 1. convencional y 2. QIAamp-DNA mini kit®. La eficiencia del ADN fue valorada por espectrofotometría y amplificación del gen GAPDH. La concentración de ADN de las muestras extraídas por el método convencional fue de 65,52 ng/µL ±11,47 (promedio ± EE) y la relación 260/280 varió entre 0,52 y 2,30. De las muestras extraídas por el método comercial, la concentración media de ADN fue 60,89 ng/µL ± 6,02, con una absorbancia que osciló entre 0 y 2,64. El ADN obtenido fue sometido a PCR, de 47 muestras extraídas por ambos métodos, 25 y 23 respectivamente amplificaron exitosamente el gen GAPDH. Los métodos usados para la obtención de ADN presentaron un desempeño similar, revelando así su potencial utilidad en estudios retrospectivos a partir de biopsias embebidas en parafina en condiciones inadecuadas.
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| Tipo: |
Info:eu-repo/semantics/article
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| Idioma: |
Espanhol
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| Identificador: |
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-548X2011000200007
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| Editor: |
Universidad Nacional de Colombia, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología
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| Formato: |
text/html
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| Fonte: |
Acta Biológica Colombiana v.16 n.2 2011
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| Direitos: |
info:eu-repo/semantics/openAccess
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