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| Agüero,J.A; Hotzel,H; Aguilar,Lisandra; Lima,Claudia; Sachse,K; Martínez,Siomara. |
| Mycoplasma gallisepticum es el agente etiológico fundamental del síndrome respiratorio crónico de los pollos; constituye el micoplasma más importante desde el punto de vista económico para la avicultura. Un fragmento de ADN de aproximadamente 800pb de este microorganismo, amplificado mediante la reacción en cadena de la polimerasa a partir del plásmido pTTQ18 recombinante, se clonó en el vector de expresión pQE-32. El polipéptido se expresó fusionado a una secuencia de seis histidinas, por lo que la talla final fue de 31kDa, y se detectó mediante inmunotransferencia con un antisuero policlonal contra M. gallisepticum y con un anticuerpo monoclonal contra histidina. El polipéptido se purificó mediante cromatografía de afinidad con quelatos metálicos... |
| Tipo: Journal article |
Palavras-chave: Mycoplasma gallisepticum; Clonaje; Expresión; Purificación; PCR; Cromatografía de afinidad por quelatos metálicos níquel-ácido nitrilotriacético (Ni-NTA). |
| Ano: 2011 |
URL: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0253-570X2011000100005 |
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| Agüero,J.A; Ceballo,Yanaysi; González,Yadmell; Martínez,Siomara; Enríquez,G.A. |
| El virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa (IBDV), un miembro de la familia Birnaviridae, es un virus ARN de doble cadena, capaz de causar considerables pérdidas económicas al inducir destrucción de la bolsa, inmunosupresión y alta mortalidad en pollos jóvenes. La cápsida del virus está formada por las proteínas estructurales VP2 y VP3. Se amplificó por PCR el gen vp3 (870pb), a partir del vector pcDNA3-Poly que contiene el gen que codifica para la poliproteína (pVP2-VP4-VP3) del virus. El producto de PCR se clonó en el plásmido pQE30 y se expresó en la cepa M15 de E. coli a altos niveles como una proteína de fusión con una cola de hexahistidina. Así se obtuvo una proteína antigénicamente activa, como se demostró por Western-Blot con un anticuerpo... |
| Tipo: Journal article |
Palavras-chave: VP3; IBDV; Cápsida; Proteína recombinante; IMAC. |
| Ano: 2007 |
URL: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0253-570X2007000100007 |
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| Agüero,J.A; Sánchez,O; Barrera,Maritza; Toledo,J.R. |
| Classical swine fever virus (CSFV), belonging to the genus Pestivirus of the Flaviviridae family, is an enveloped positive stranded RNA virus highly contagious that can cause a fatal disease, characterized by fever, leukopenia and hemorrhage, with substantial economic losses. There is a great demand for a marker vaccine against CSFV. C, Erns, E1, and E2 are the structural proteins of the virus. E2 is the best candidate to be incorporated in vaccine, while Erns becomes an ideal candidate as an antigen in a differential diagnostic test. A synthetic fragment of the Erns gene (codifying for aa 109-160) was subcloned into pET28a vector. The cloning was screened by restriction analysis. The gene was expressed as a his-tag fusion protein in BL21 (DE3) E. coli... |
| Tipo: Journal article |
Palavras-chave: Erns; CSFV; Recombinant protein; IMAC. |
| Ano: 2008 |
URL: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0253-570X2008000200003 |
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