| Registro completo |
| Provedor de dados: |
65
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| País: |
Brazil
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| Título: |
Diagnóstico e genotipagem do vírus da pseudoraiva por nested-PCR e análise de restrição enzimática
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| Autores: |
Fonseca Júnior,Antônio Augusto
Carmagos,Marcelo Fernandes
D'Ambros,Régia Maria Feltrin
Braga,Alexandre Carvalho
Ciacci-Zanella,Janice
Heinemann,Marcos Bryana
Leite,Rômulo Cerqueira
Reis,Jenner Karlisson Pimenta dos
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| Data: |
2010-04-01
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| Ano: |
2010
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| Palavras-chave: |
Genotipagem
Nested-PCR
Pseudoraiva
Restrição enzimática
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| Resumo: |
A pseudoraiva (PR) é uma enfermidade viral responsável por consideráveis perdas econômicas na indústria de suínos. O vírus da pseudoraiva (PrV) apresenta apenas um sorotipo, mas, por análise de restrição enzimática, foi classificado em quatro genótipos denominados I, II, III e IV. Os métodos usados para genotipagem dependem do isolamento do vírus, da purificação do DNA viral, da restrição enzimática do genoma completo e da visualização após eletroforese. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um método mais rápido e sensível para detectar e genotipar o PrV por nested-PCR e análise de restrição enzimática. Vinte isolados do PrV das regiões Sul e Sudeste do Brasil e a estirpe padrão Shope foram replicadas em células PK-15 e submetidas à nested-PCR para o gene da glicoproteína E. Além desses vírus previamente isolados, foram avaliadas 75 amostras clínicas de cérebro de suíno em um total de 25 animais positivos para a PR no isolamento e na soroneutralização viral e 50 amostras negativas provenientes de animais negativos na soroneutralização viral e de granjas sem histórico de PR. Todas as amostras clínicas tiveram resultados compatíveis com o isolamento e a soroneutralização, e a totalidade das amostras positivas foi classificada como genótipo II. A sensibilidade analítica da nested-PCR foi de 10-1,3 TCID50 mL-1. A combinação da nested-PCR e da restrição enzimática foi capaz de detectar e genotipar o vírus com resultados em um a dois dias, sendo mais rápida que os métodos convencionais de restrição do genoma completo que podem demorar até sete dias.
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| Tipo: |
Info:eu-repo/semantics/article
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| Idioma: |
Português
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| Identificador: |
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782010000400027
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| Editor: |
Universidade Federal de Santa Maria
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| Relação: |
10.1590/S0103-84782010005000066
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| Formato: |
text/html
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| Fonte: |
Ciência Rural v.40 n.4 2010
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| Direitos: |
info:eu-repo/semantics/openAccess
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