Data/hora: 15/06/2024 11:13:23

Provedor de dados: | 14
País: | Brazil

Título:

Isolamento de células gigantes em galhas de raízes de leguminosas por microdissecção a laser (MDL).

Isolation of giant cells from legume rootgalls by laser microdissection (LMD).

Autores: | NIELEN, S.; SA, M. F. G. de; GUIMARAES, P. M.; ARAUJO, A. C. G. de.
Data: | 2023-03-10
Ano: | 2023
Palavras-chave: | Microdissecção a laser; Laser microdissection; Single-cell transcriptome; Nematoides das galhas; Transcritoma célula-específico; Células gigantes; Soja; Amendoim; Root-knot nematodes; Giant cells; Soybeans; Peanuts.
Resumo: | O desenvolvimento de novas estratégias para a produção de cultivares resistentes aos nematoides das galhas inclui o maior conhecimento de genes envolvidos no desenvolvimento de células gigantes (CG), formadoras dos sítios de alimentação, durante a infecção de plantas suscetíveis por nematoides da galha. A análise transcricional baseada em todo o tecido da raiz ou da galha formada pelo parasita resulta na identificação de numerosos genes diferencialmente expressos. Para identificar genes específicos da interação planta-nematoides formadores de galhas (NFG) e genes de suscetibilidade que possibilitam a infecção, uma abordagem promissora é estudar o transcritoma específico das CGs. Neste estudo, a técnica de microdissecção a laser foi estabelecida para isolamento de CGs produzidas por Meloidogyne spp., em formação nas raízes de leguminosas (soja e amendoim) suscetíveis. Para tal, CGs de segmentos de raízes coletados após a inoculação com Juvenis 2 (J2) e incluidos em Paraplast foram microdissectadas a laser, e utilizadas para extração do RNA, seguida da síntese de DNA complementar, e da amplificação por PCR de genes expressos constitutivamente, como indicação indireta da integridade do RNA. O detalhamento do método e fluxo de trabalho aqui descritos para microdissecção a laser de CGs e células vasculares das raízes dessas leguminosas, com subsequente isolamento de RNA, constitui uma ferramenta importante para a análise molecular detalhada durante a interação planta-patógeno.
Tipo: | Folhetos
Idioma: | Português

Identificador:

Brasília, DF: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, 2023.

http://www.infoteca.cnptia.embrapa.br/infoteca/handle/doc/1152268

Relação: | (Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento, 379).
Fonte: | openAccess