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Provedor de dados: | 32
País: | Mexico
Título: | Aislamiento y caracterización de Streptococcus bovis y estudio inicial para el aislamiento de su bacteriófago
Autores: | López Garrido, Serafín Jacobo.
Data: | 2012-09-08
Ano: | 2008
Palavras-chave: | Rumen; Streptococcus bovis; Aislamiento; Iiofilización; Bacteriófago; Doctorado; Ganadería; Isolation; Lyophilization; Bacteriophage.
Resumo: | El objetivo del presente estudio fue obtener un cultivo puro de la bacteria ruminal  Streptococcus bovis a partir de líquido ruminal de ovinos alimentados con una dieta  alta en sorgo (70 % en base seca). Además, se analizó su actividad fermentativa  (producción de AGV y lactato) y el proceso de liofilizado como método de  conservación, y se realizaron ensayos para expresar su bacteriófago. Para el  aislamiento se usó un medio comercial para Streptococcus spp. (Merck) preparado  bajo anaerobiosis. Para la identificación se usó el sistema API 20 Strep, reacción  catalasa, morfología celular y tinción de Gram. Con la prueba API 20 Strep se  comprobó que la bacteria aislada pertenece a la especie S. bovis. Esta bacteria  tiene forma esférica a ovoide, de 0.8 a 1.5 !m de diámetro, es Gram positiva, no  mótil, no forman esporas, catalasa negativo y se agrupa en pares o en cadenas de  cuatro a ocho células. Su tiempo de generación en un medio a base de glucosa,  celobiosa, almidón y fluido ruminal (GCA-FR) fue de 14 min. En medio GCA-FR,  esta bacteria presentó una fermentación láctica-acética después de 4 h de  incubación, con una producción de acetato, propionato, butirato y lactato de 17.48,  0.88, 0.54 y 39.93 mmol, respectivamente. La concentración total de la bacteria S.  bovis fue de 25x1010/g y de 20x1010/g antes y después del proceso de liofilización;  con una viabilidad bacteriana de 80 %, lo que permite concluir que el proceso de  liofilizado es un excelente método de conservación. Se usó mitomicina (2 !g/ml de  medio de cultivo) y cloroformo (1 mL/5 mL de medio) para inducir la expresión del  bacteriófago contra S. bovis. Aunque se logro inducir unidades formadoras de  placas (UFPL) con ambos reactivos, la mitomicina dio mejores resultados (1.4 x 104  UFPL/mL de medio de cultivo). Sin embargo, no siempre se logro inducir la fase  lítica del bacteriófago, por tanto se sugiere evaluar una concentración mayor de  mitomicina en los medios de cultivo._______The objective of this study was obtain a pure culture of the rumen bacteria  Streptococcus bovis from the rumen liquid of lambs fed a high sorghum grain diet  (70 % dry matter basis). Also, the fermentative activity (VFA and lactate production)  the freeze dry process as method of bacteria conservation were analyzed and  assays to express its bacteriophage were analyzed. A commercial medium for  Streptococcus spp. (Merk) made under anaerobic conditions was used for isolation.  The API 20 Strep, catalase reaction, cell morphology and Gram reaction were used  for bacteria identification.  It was confirmed that the isolated bacteria belongs to the  species S. bovis with the API 20 Strep test. This bacterium is spherical or ovoid in  shape, 0.8 to 1.5 !m in diameter, Gram positive, non motile, non sporing, catalase  negative, occurring in pairs or in chains containing 4-8 cells.  Its generation time was  14 min in a glucose, cellobiose, starch, and ruminal fluid medium (GCS-RF).  After 4  h of incubation in GCS-RF medium this bacteria showed a lactate-acetate  fermentation,  with an acetate, propionate, butyrate and lactate production of 17.48,  0.88, 0.54 and 39.93 mmol, respectively. The S. bovis concentration was 25x1010/g  and 20x1010/g before and after the lyophilization process; with 80 % of cell viability, it  is concluded that the lyophilization process is an excellent method for conservation.  Mytomicin (2!g/ml) and chloroform (1mL/5mL of culture medium) were used to  induce the bacteriophage against S. bovis. With both reactives it was produced  plaque forming units  (PLFU), but mytomicin gave better results (1.4x104 PLFU/mL  of culture medium). However, not always it was possible to induce the bacteriophage  lytic phase, it is suggested to evaluate a high concentration of mytomicin in the  culture medium.
Tipo: | Tesis
Idioma: | Espanhol
Identificador: | http://hdl.handle.net/10521/1402