Data/hora: 16/06/2024 03:38:39

Provedor de dados: | 62
País: | Brazil
Título: | Sexagem de embriões bovinos fecundados in vitro pela técnica de PCR multiplex
Autores: | LUZ,Marcelo Rezende; WATANABE,Yeda Fumie; FERRO,Jesus Aparecido; FERRO,Maria Inês T.; MAURO,Sônia Marli Singaretti de; HOSSEPIAN DE LIMA,Vera Fernanda Martins; FRANCESCHINI,Paulo Henrique.
Data: | 2000-12-01
Ano: | 2000
Palavras-chave: | Sexagem; Embrião; Bovino; PCR.
Resumo: | Neste trabalho, a técnica de PCR ("polymerase chain reaction") foi utilizada para a sexagem de 92 embriões bovinos fertilizados in vitro. Os embriões originaram-se de fertilização in vitro de oócitos aspirados de ovários de fêmeas bovinas, provenientes de abatedouros comerciais. Os oócitos foram maturados, fertilizados e cultivados até o estádio de blastocisto. Os embriões foram lavados em solução de PBS, transferidos para tubos de polipropileno contendo água ultrapura, e imediatamente congelados a -196ºC. Os embriões foram descongelados sobre isopor contendo gelo picado e tratados com proteinase K. Para a reação de PCR, utilizaram-se alíquotas de 34 µl de cada tudo, onde foram acrescidos dois pares de primers, seqüência BC1.2 e seqüência satélite 1.715, desoxinucleotídeos, MgCl2, tampão PCR 10X, TaqDNA polimerase e água, em um volume final de 50 µl. As amostras foram amplificadas e a eletroforese realizada em gel de poliacrilamida a 8%. Os géis foram corados com solução de brometo de etídio e analisados em transiluminador de luz ultravioleta. Um índice de 93,47% de amplificação foi atingido, com 41 embriões (47,67%) machos e 45 (52,32%) embriões fêmeas. O uso de gel de poliacrilamida a 8% foi eficaz na separação de fragmentos de DNA muito próximos.
Tipo: | Info:eu-repo/semantics/article
Idioma: | Português
Identificador: | http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1413-95962000000600006
Editor: | Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia / Universidade de São Paulo
Relação: | 10.1590/S1413-95962000000600006
Formato: | text/html
Fonte: | Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science  v.37 n.6 2000
Fonte: | info:eu-repo/semantics/openAccess