Data/hora: 06/06/2024 08:43:01

Provedor de dados: 	65	
País: 	Brazil	
Título: 	Diagnóstico e genotipagem do vírus da pseudoraiva por nested-PCR e análise de restrição enzimática	
Autores: 	Fonseca Júnior,Antônio Augusto; Carmagos,Marcelo Fernandes; D'Ambros,Régia Maria Feltrin; Braga,Alexandre Carvalho; Ciacci-Zanella,Janice; Heinemann,Marcos Bryana; Leite,Rômulo Cerqueira; Reis,Jenner Karlisson Pimenta dos.	
Data: 	2010-04-01	
Ano: 	2010	
Palavras-chave: 	Genotipagem; Nested-PCR; Pseudoraiva; Restrição enzimática.	
Resumo: 	A pseudoraiva (PR) é uma enfermidade viral responsável por consideráveis perdas econômicas na indústria de suínos. O vírus da pseudoraiva (PrV) apresenta apenas um sorotipo, mas, por análise de restrição enzimática, foi classificado em quatro genótipos denominados I, II, III e IV. Os métodos usados para genotipagem dependem do isolamento do vírus, da purificação do DNA viral, da restrição enzimática do genoma completo e da visualização após eletroforese. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um método mais rápido e sensível para detectar e genotipar o PrV por nested-PCR e análise de restrição enzimática. Vinte isolados do PrV das regiões Sul e Sudeste do Brasil e a estirpe padrão Shope foram replicadas em células PK-15 e submetidas à nested-PCR para o gene da glicoproteína E. Além desses vírus previamente isolados, foram avaliadas 75 amostras clínicas de cérebro de suíno em um total de 25 animais positivos para a PR no isolamento e na soroneutralização viral e 50 amostras negativas provenientes de animais negativos na soroneutralização viral e de granjas sem histórico de PR. Todas as amostras clínicas tiveram resultados compatíveis com o isolamento e a soroneutralização, e a totalidade das amostras positivas foi classificada como genótipo II. A sensibilidade analítica da nested-PCR foi de 10-1,3 TCID50 mL-1. A combinação da nested-PCR e da restrição enzimática foi capaz de detectar e genotipar o vírus com resultados em um a dois dias, sendo mais rápida que os métodos convencionais de restrição do genoma completo que podem demorar até sete dias.	
Tipo: 	Info:eu-repo/semantics/article	
Idioma: 	Português	
Identificador: 	http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782010000400027	
Editor: 	Universidade Federal de Santa Maria	
Relação: 	10.1590/S0103-84782010005000066	
Formato: 	text/html	
Fonte: 	Ciência Rural  v.40 n.4 2010	
Fonte: 	info:eu-repo/semantics/openAccess