Data/hora: 02/06/2024 14:39:01

Provedor de dados: | 82
País: | Brazil
Título: | Análise comparativa da estabilidade do DNA de Dalbulus maidis (DeLong &amp;amp; Wolcott) (Hemiptera: Cicadellidae) sob diferentes métodos de preservação para uso em RAPD-PCR
Autores: | OLIVEIRA,CHARLES M.; FUNGARO,MARIA H.P.; CAMARGO,LUÍS E.A.; LOPES,JOÃO R.S.
Data: | 2002-06-01
Ano: | 2002
Palavras-chave: | Insecta; Cigarrinha-do-milho; Marcador molecular; Conservação de DNA; Técnica de armazenamento.
Resumo: | A preservação adequada do DNA de um determinado organismo é fundamental para o sucesso no uso de técnicas moleculares como RAPD-PCR. O objetivo deste trabalho foi comparar métodos simples de preservação de espécimes de Dalbulus maidis (DeLong &amp;amp; Wolcott) (Hemiptera: Cicadellidae) quanto à quantidade e qualidade do DNA para uso em RAPD-PCR, após períodos sucessivos de armazenamento. Avaliaram-se oito métodos: congelamento (-20ºC); álcool etílico 70% (-20ºC e temperatura ambiente); álcool etílico absoluto (-20ºC e temperatura ambiente); secagem ao ar; e preservação em tampão de extração (inseto inteiro e macerado). A intervalos de 10-30 dias, o DNA foi extraído, quantificado e amplificado via RAPD-PCR pelo oligonucleotídeo OPA-04. A qualidade do DNA extraído foi observada em gel de agarose 0,8%. Após 210 dias de armazenamento, o congelamento (-20ºC) mostrou ser a melhor técnica. Quantidades satisfatórias de DNA também foram obtidas dos insetos conservados em álcool etílico absoluto (-20ºC), álcool etílico 70% (-20ºC) e tampão de extração (inseto inteiro e macerado). Insetos conservados em álcool etílico absoluto (temperatura ambiente), em álcool etílico 70% (temperatura ambiente) e secos ao ar mostraram-se impróprios para estudos com RAPD-PCR após 120, 60 e 10 dias de armazenamento, respectivamente.
Tipo: | Info:eu-repo/semantics/article
Idioma: | Português
Identificador: | http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1519-566X2002000200008
Editor: | Sociedade Entomológica do Brasil
Relação: | 10.1590/S1519-566X2002000200008
Formato: | text/html
Fonte: | Neotropical Entomology  v.31 n.2 2002
Fonte: | info:eu-repo/semantics/openAccess