| Resumo: |
Cryopreservation tests were carried out for Platymonas "Batan" sp., P. suesica, Isochrysis aff galbana, Chlorella minutissima, Nannochloris occulata, Chaetoceros gracilis and C. "BA" sp. The focus of the protocol was based on the duration of incorporation and cryoprotector concentration (DMSO). Two methods were used to compare the effects of each freezing protocol for algae survival. The first method allows evaluating survival rate through orange acridine coloration and epifluorescence microscope readings. The second one requires culturing each sample and growth curbs are established through daily readings of algal solutions optical density. Freezing the samples was either done directly through liquid nitrogen freezing (-196°C) or through slow freezing, down to -30°C followed by nitrogen immersion. Notably, this second method significantly shortens the latency duration prior to re-growth.
Les essais de cryopréservation ont porté sur Platymonas sp. "Batan", P. suesica, Isochrysis aff galbana, Chlorella minutissima, Nannochloris occulata, Chaetoceros gracilis et C. sp. "BA". La mise au point du protocole a été basée sur la durée d'incorporation et la concentration en cryoprotecteur (DMSO). Deux méthodes sont utilisées pour comparer les effets de chaque protocole de congélation sur la survie des algues. La première méthode permet d'évaluer le taux de survie par coloration à l'acridine orange et lecture en microscopie à épifluorescence. La deuxième nécessite la mise en culture de chaque échantillon et les courbes de croissances sont dressées par lecture journalière de la densité optique des solutions algales. Le refroidissement des échantillons a été effectué soit par congélation directe dans l'azote liquide (-196°C) soit par congélation avec descente lente jusqu'à -30°C puis plongée dans l'azote. Cette deuxième méthode permet d'ailleurs de raccourcir de façon sensible la durée de latence avant reprise de croissance.
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