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Caipira sweet orange + Rangpur lime: a somatic hybrid with potential for use as rootstock in the Brazilian citrus industry Genet. Mol. Biol.
Mendes-da-Glória,Fernanda Januzzi; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Camargo,Luis Eduardo Aranha; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi.
Protoplast culture following polyethylene glycol-induced fusion resulted in the regeneration of somatic hybrid plants between Caipira sweet orange (Citrus sinensis L. Osbeck) and Rangpur lime (C. limonia L. Osbeck). The plants were confirmed as somatic hybrids by leaf morphology, chromosome number and RAPD profile. All regenerated plants were tetraploid (2n = 4x = 36), with intermediate leaf morphology and complementary RAPD banding profile of both parents. This combination may be useful as a rootstock for the citrus industry in Southeastern Brazil since this somatic hybrid could combine the drought tolerance and vigor of Rangpur lime with the blight tolerance of Caipira sweet orange.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article
Ano: 2000 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1415-47572000000300026
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In vitro organogenesis in watermelon cotyledons PAB
Krug,Maria Graziela Zagatto; Stipp,Liliane Cristina Libório; Rodriguez,Adriana Pinheiro Martinelli; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi.
The objective of this work was to study the in vitro organogenesis of Citrullus lanatus, by the induction of adventitious buds in cotyledon segments cultured in medium supplemented with cytokinin. Explants were collected from one, three and five-day-old in vitro germinated seedlings, considering the distal and proximal cotyledon regions. The data obtained showed that in vitro organogenesis of watermelon occurred with higher efficiency, when cotyledon segments from the proximal region collected from three-day-old seedlings were cultivated in medium MS, supplemented with BAP (1 mg L-1) and coconut water (10%). The histological study showed that the organogenesis occurs directly, without callus formation, on epidermal and subepidermal layers of the explants....
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Citrullus lanatus; Histological study; Adventitious bud.
Ano: 2005 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-204X2005000900004
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GUS gene expression driven by a citrus promoter in transgenic tobacco and 'Valencia' sweet orange PAB
Azevedo,Fernando Alves de; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Schinor,Evandro Henrique; Paoli,Luis Gustavo de; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi; Harakava,Ricardo; Gabriel,Dean W.; Lee,Richard F..
The objective of this work was the transformation of tobacco and 'Valencia' sweet orange with the GUS gene driven by the citrus phenylalanine ammonia-lyase (PAL) gene promoter (CsPP). Transformation was accomplished by co-cultivation of tobacco and 'Valência' sweet orange explants with Agrobacterium tumefaciens containing the binary vector CsPP-GUS/2201. After plant transformation and regeneration, histochemical analyses using GUS staining revealed that CsPP promoter preferentially, but not exclusively, conferred gene expression in xylem tissues of tobacco. Weaker GUS staining was also detected throughout the petiole region in tobacco and citrus CsPP transgenic plants.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Xylella fastidiosa; PAL; Citrus variegated chlorosis; Cultivar resistance.
Ano: 2006 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-204X2006001100008
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Reaction of sweet orange cultivars expressing the attacin A gene to 'Candidatus Liberibacter asiaticus' infection PAB
Felipe,Rafaella Teles Arantes; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Lopes,Silvio Aparecido; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi; Behling,Maurel; Pereira Junior,Ernani Vicente.
The objective of this work was to evaluate the reaction of four sweet orange cultivars expressing the attacin A gene to 'Candidatus Liberibacter asiaticus' (Las) infection, a bacterium associated to huanglongbing (HLB) disease. Transgenic sweet orange plants of Hamlin, Natal, Pêra, and Valência cultivars, as well as nontransgenic controls received inocula by grafting budwood sections of HLB-infected branches. Disease progression was evaluated through observations of leaf symptoms and by polymerase chain reaction (PCR) analysis, eight months after inoculation. A completely randomized design was used, with four experiments (one for each cultivar) performed simultaneously. Bacteria title was estimated by quantitative PCR (qPCR). HLB symptoms and Las titers...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Citrus sinensis; Antibacterial peptide; Disease resistance; Genetic transformation; Huanglongbing.
Ano: 2013 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-204X2013001100004
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Transformação genética de laranja 'Valência' com o gene cecropin MB39 PAB
Paoli,Luis Gustavo de; Camargo,Raquel Luciana Boscariol; Harakava,Ricardo; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves.
O objetivo deste trabalho foi obter plantas transgênicas de laranja 'Valência' com o gene cecropin MB39 controlado pelo promotor do gene da fenilalanina-amônia-liase de citros, visando a expressão gênica específica nos vasos do xilema. A transformação genética foi realizada via Agrobacterium tumefaciens por meio do co-cultivo de segmentos de epicótilo. Onze plantas transgênicas foram identificadas por PCR, pela amplificação do fragmento esperado de 189 pb, as quais foram aclimatizadas em casa de vegetação. A integração do transgene foi confirmada em três plantas pela análise de transferência de Southern.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Agrobacterium tumefaciens; Citrus sinensis; CVC; Peptídeo antibacteriano; Xilema.
Ano: 2007 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-204X2007001100020
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Indução e cultivo in vitro de gemas adventícias em segmentos de epicótilo de laranja-azeda PAB
Silva,Rosely Pereira da; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves.
O objetivo deste trabalho foi avaliar a indução e a formação de gemas adventícias em explantes de laranja-azeda, pelo uso de fitorreguladores. Em experimentos de organogênese in vitro foram avaliados 6-benzilaminopurina (BAP), thidiazuron (TDZ) e cinetina (CIN), em diferentes concentrações e sob duas condições de luminosidade; BAP e CIN combinados ou não com ácido naftalenoacético (ANA); e BAP e CIN isoladamente ou combinados entre si. Segmentos de epicótilo de 1 cm de comprimento, provenientes de plântulas de laranja-azeda germinadas in vitro, foram utilizados como explantes. Para induzir a formação de gemas, os segmentos foram cultivados em meio MT com ou sem adição de fitorreguladores. O material foi cultivado a 27ºC em ausência de luz por 30 dias,...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Citrus aurantium; Fitorregulador; Micropropagação; Organogênese.
Ano: 2008 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-204X2008001000011
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Somatic hybridization between Citrus sinensis (L.) Osbeck and C. grandis (L.) Osbeck PAB
Calixto,Marcia Cristina; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi; Vieira,Maria Lúcia Carneiro.
This work had as objective to produce citrus somatic hybrids between sweet oranges and pummelos. After chemical fusion of sweet orange embryogenic protoplasts with pummelo mesophyll-derived protoplasts, plants were regenerated by somatic embryogenesis and acclimatized in a greenhouse. The hybrids of 'Hamlin' sweet orange + 'Indian Red' pummelo and 'Hamlin' sweet orange + 'Singapura' pummelo were confirmed by leaf morphology, chromosome counting and molecular analysis. These hybrids have potential to be used directly as rootstocks aiming blight, citrus tristeza virus, and Phytophthora-induced disease tolerance, as well as for rootstocks improvement programs.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Genetic improvement; Protoplast fusion; Rootstock.
Ano: 2004 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-204X2004000700015
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Stomatal analysis of citrus somatic hybrids obtained by protoplast fusion PAB
Costa,Maria Angélica Pereira de Carvalho; Almeida,Weliton Antonio Bastos de; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi; Rodriguez,Adriana Pinheiro Martinelli.
The objective of this work was to evaluate leaf epidermis morphological characteristics of three citrus somatic hybrids, compared to their parents. Parental and somatic hybrid young leaves were collected and processed for scanning electron microscope observations. Citrus polyploid hybrids have fewer stomata per area and these are larger compared to their diploid parental parents. No differences in internal arrangement of the stomatal cells were detected between parental plants and somatic hybrids. Additional studies may determine if these differences will influence physiological behavior of the plants in the field.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Stoma; Somatic hybridization; Scanning electron microscopy; Polyploidy.
Ano: 2004 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-204X2004000300015
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In vitro organogenesis from internodal segments of adult sweet orange plants PAB
Bassan,Meire Menezes; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Miyata,Luzia Yuriko; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi.
The objective of this work was to optimize in vitro plant regeneration via organogenesis from tissues of adult 'Hamlin', 'Pêra', and 'Valência' sweet orange plants. Explants were grown in EME culture medium with different concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP) and naphthaleneacetic acid (NAA), at 27ºC in the absence of light for 50 days, followed by a 16-hour photoperiod for 20 days. Regeneration was assessed 50 and 70 days after in vitro culture. Organogenesis in cultivars Hamlin and Valência was promoted by EME supplemented with BAP, while NAA showed no apparent effect.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/report Palavras-chave: Citrus sinensis; Adventitious buds; Biotechnology; Plant growth regulators.
Ano: 2011 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-204X2011000600015
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Agrobacterium-mediated genetic transformation of 'Hamlin' sweet orange PAB
Mendes,Beatriz Madalena Januzzi; Boscariol,Raquel Luciana; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Almeida,Weliton Antonio Bastos de.
The development and optimization of efficient transformation protocols is essential in new citrus breeding programs, not only for rootstock, but also for scion improvement. Transgenic 'Hamlin' sweet orange (Citrus sinensis (L.) Osbeck) plants were obtained by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of epicotyl segments collected from seedlings germinated in vitro. Factors influencing genetic transformation efficiency were evaluated including seedling incubation conditions, time of inoculation with Agrobacterium and co-culture conditions. Epicotyl segments were adequate explants for transformation, regenerating plants by direct organogenesis. Higher percentage of transformation was obtained with explants collected from seedlings germinated in...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Citrus sinensis; Epicotyls; Seedlings; Transgenics; Breeding methods.
Ano: 2002 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-204X2002000700009
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Genetic transformation of sweet oranges with the D4E1 gene driven by the AtPP2 promoter PAB
Attílio,Lísia Borges; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Harakava,Ricardo; Silva,Tatiane Loureiro da; Miyata,Luzia Yuriko; Stipp,Liliane Cristina Libório; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi.
The objective of this work was to produce transgenic 'Pêra' and 'Valência' sweet orange plants using the D4E1 gene driven by the Arabidopsis thaliana phloem protein (AtPP2) promoter and to quantify transgene expression in different transformation events. Genetic transformation experiments were carried out with epicotyl segments co‑cultivated with Agrobacterium tumefaciens. Six plants from 'Pêra' sweet orange and seven plants from 'Valência' sweet orange were confirmed as different transgenic events by means of the polymerase chain reaction (PCR) and the Southern blot techniques. Transgene expression was quantified using real‑time quantitative PCR. D4E1 gene expression levels vary from 5 up to 50 times among different transformation events.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Citrus sinensis; Antimicrobial peptide; Tissue‑specific promoter.
Ano: 2013 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-204X2013000700006
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Enraizamento de estacas do híbrido somático laranja 'caipira' + limão 'Volkameriano' e de seus genitores Rev. Bras. Frutic.
Bassan,Meire Menezes; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi.
Objetivou-se neste trabalho comparar o enraizamento de estacas do híbrido somático laranja 'Caipira' (C. sinensis L. Osbeck) + limão 'Volkameriano' (C. volkameriana V. Tennore et Pasquale) com aquelas dos seus genitores tratadas com ácido indolbutírico (AIB) (0; 500; 1.000 e 2.000 mg L-1). As estacas de laranja 'Caipira' e limão 'Volkameriano' foram retiradas de plantas obtidas a partir de sementes, e as do híbrido somático, de plantas enxertadas recém-podadas. O delineamento experimental utilizado foi um fatorial 3 x 4 (genótipos x concentrações de AIB) inteiramente casualizado, com quatro repetições de 10 estacas por repetição, totalizando 480 estacas. As estacas foram cultivadas em bandejas de poliestireno expandido, contendo substrato comercial, em...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Biotecnologia; Citrus; Estaquia; Porta-enxerto; Rizogênese.
Ano: 2009 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-29452009000200041
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Regeneração de plantas após fusão de protoplastos de tangelo 'Page' e toranja 'Lau Tau' Rev. Bras. Frutic.
Carvalho,Dayse Cristina de; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi; Carvalho,Carlos Roberto de.
Buscou-se a hibridação somática entre tangelo 'Page' e toranja 'Lau Tau' visando à produção de porta-enxerto semelhante à laranja-azeda, por esta espécie ser considerada um provável híbrido entre C. reticulata e C. grandis. Após isolamento, fusão e cultivo de protoplastos, obtiveram-se brotações que foram enxertadas in vitro, em laranja 'Hamlin'. Dezessete plantas foram aclimatizadas em casa de vegetação. A análise de citometria de fluxo confirmou a constituição diplóide dessas plantas. Marcadores moleculares RAPD das plantas regeneradas apresentaram padrão de bandas similar ao de tangelo 'Page'. Entretanto, todas as plantas apresentaram conformação fenotípica diferente dos genitores.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Citros; Cultura de tecidos; Hibridação somática; Porta-enxerto; Melhoramento genético.
Ano: 2007 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-29452007000200027
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Reação de híbridos somáticos de citros à infecção por Phytophthora nicotianae Rev. Bras. Frutic.
Bassan,Meire Menezes; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi; Freire,Bruno Forli Schwartz; Cantuarias-Avilés,Tatiana Eugenia; Beltrame,André Boldrin.
Este trabalho avaliou a resistência à infecção de tronco e de raízes por Phytophthora nicotianae em híbridos somáticos de citros com potencial para serem utilizados como porta-enxertos. Os híbridos somáticos avaliados foram laranja 'Hamlin' (Citrus sinensis) + toranja 'Indian Red' (Citrus grandis) (plantas 1 e 2) e laranja 'Hamlin' (C. sinensis) + toranja 'Singapura' (C. grandis). Plantas de limão 'Cravo' (Citrus limonia), laranja 'Caipira' (C. sinensis), laranja-azeda (C. aurantium) e Poncirus trifoliata 'Davis A' (Poncirus trifoliata) foram utilizadas como plantas-controle devido à reação conhecida à infecção pelo patógeno. Avaliações realizadas entre 30 e 60 dias após as inoculações com o patógeno incluíram o comprimento das lesões no tronco e a massa...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Gomose; Laranja; Melhoramento; Porta-enxerto.
Ano: 2010 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-29452010000200012
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In vitro organogenesis and genetic transformation of mandarin cultivars Rev. Bras. Frutic.
Soriano,Leonardo; Tavano,Eveline Carla da Rocha; Correa,Marcelo Favaretto; Harakava,Ricardo; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves.
Abstract The in vitro organogenesis of Fremont (Citrus clementina x ), Citrus reticulataThomas (Citrus reticulata), and Nules (Citrus clementina) mandarins was evaluated aiming to optimize a regeneration protocol that could be applied in genetic transformation. The use of epicotyl-derived explants resulted in higher explant responsiveness and number of shoots developed per explant when compared with the use of internodal-derived explants. The highest efficiency in shoot regeneration was observed in the presence of 1 mg L-1 of BAP, regardless of the explant type and cultivar. The in vitro organogenesis protocol produced transgenic plants from three mandarin cultivars expressing attA gene under the control of phloem-specific promoters.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Antimicrobial peptide; Cultivar improvement; Cytokinin; Huanglongbing; Transgenic plants.
Ano: 2019 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-29452019000200802
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In vitro organogenesis of rangpur lime Rev. Bras. Frutic.
Soriano,Leonardo; Tavano,Eveline Carla da Rocha; Behling,Maurel; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi.
Rangpur lime (Citrus limonia Osbeck) in vitro organogenesis was studied based on explant type and cytokinin culture media supplementation. Four explants types collected from epicotyl or hypocotyl regions of in vitro germinated seedlings were evaluated. The epicotyl-derived explants consisted of epicotyl segments and the hypocotyl-derived explants consisted of the entire hypocotyl segment, the hypocotyl segment attached to a cotyledon fragment, and the hypocotyl segment divided longitudinally. The explants were cultured on EME culture medium supplemented with benzylaminopurine (0, 0.5, 1.0, or 1.5 mg L-1). The evaluation was performed after 6 weeks. Best results considering both the explant responsiveness and number of shoots developed per explants were...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Adventitious shoot; Citrus limonia; Tissue culture.
Ano: 2012 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-29452012000200006
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Organogênese in vitro a partir de diferentes regiões do epicótilo de Citrus sp Rev. Bras. Frutic.
Schinor,Evandro Henrique; Paoli,Luis Gustavo de; Azevedo,Fernando Alves de; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi.
O estabelecimento de protocolos para regeneração de plantas in vitro é essencial para o uso de técnicas de transformação genética no melhoramento de citros. Visando à obtenção de um protocolo eficiente de regeneração in vitro para laranja-azeda (Citrus aurantium), laranjas 'Natal' e 'Pêra' (C. sinensis), limão 'Volkameriano' (C. volkameriana) e citrange 'Carrizo' (Poncirus trifoliata x C. sinensis), avaliou-se a resposta morfogênica de diferentes regiões do epicótilo (basal, mediana e apical) em relação a distância do nó cotiledonar, na presença (1,0 mg/L-1) ou ausência de 6-BAP, em meio de cultura MT. Após 60 dias, avaliaram-se a porcentagem de explantes responsivos e o número de gemas adventícias por explante. A resposta morfogênica em função da região...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Gema adventícia; Cultura de tecidos; Morfogênese.
Ano: 2006 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-29452006000300027
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Micropropagação de citrumelo 'Swingle' pelo cultivo in vitro de gemas axilares Rev. Bras. Frutic.
Cantagallo,Fabrizzio de Souza; Azevedo,Fernando Alves de; Schinor,Evandro Henrique; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi.
O uso da micropropagação na produção de mudas constitui-se em técnica de multiplicação importante, embora não seja usual para citros, cujos porta-enxertos são obtidos por sementes. Entretanto, pode ser alternativa viável quando a demanda por material propagativo for superior em relação à oferta de sementes. Buscou-se micropropagar o citrumelo 'Swingle' através de gemas axilares, excisadas de plantas cultivadas em meio MT, seis semanas após a semeadura e submetidas a combinações de 6-benzilaminapurina (BAP) (0,0; 0,5; 1,0 e 1,5 mg L-1) e ácido naftaleno acético (ANA) (0,0 e 0,5 mg L-1). As brotações foram enraizadas em meio RMAN para posterior aclimatização. O número de brotações induzidas foi afetado apenas pelas concentrações de BAP. Melhor...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Citros; Porta-enxerto; Multiplicação de brotos; Cultura de tecidos.
Ano: 2005 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-29452005000100036
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In vitro organogenesis in some citrus species Rev. Bras. Frutic.
Schinor,Evandro Henrique; Azevedo,Fernando Alves de; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi.
In vitro organogenesis of Citrus was studied for the genotypes Citrus sinensis cv. 'Natal', C. limonia, C. volkameriana, and C. aurantium, with the use of epicotyl segments-derived explants, cultured in MT salts and vitamins medium supplemented with different concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP - 0.0; 0.5; 1.0; 1.5 or 2.0 mg L-1). For the recalcitrant genotypes C. limonia and C. aurantium the in vitro organogenesis was also studied with internodal segments-derived explants, cultured in MT salts and vitamins medium supplemented with 0; 0.5; 1.0; 2.0, or 4.0 mg L-1 of BAP. The efficiency of culture medium supplementation with the combination of BAP (0.0; 1.0, or 2.0 mg L-1) and NAA (1-naphthaleneacetic acid - 0.0; 0.3, or 0.5 mg L-1) in the...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Epicotyl segment; Internodal segment; C. sinensis; C. limonia; C. volkameriana; C. aurantium.
Ano: 2011 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-29452011000200024
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Sour orange bud regeneration and in vitro plant development related to culture medium composition and explant type Rev. Bras. Frutic.
Silva,Rosely Pereira da; Souza,Amancio José de; Mendes,Beatriz Madalena Januzzi; Mourão Filho,Francisco de Assis Alves.
In order to evaluate the formation of adventitious buds and in vitro regeneration of sour orange plants (Citrus aurantium L.) two organogenesis-inducing experiments were conducted. In the first experiment, the induction and in vitro regeneration of adventitious buds were tested on epicotyl and internodal segments under the influence of BAP or KIN associated with NAA. The second experiment evaluated the in vitro regeneration of sour orange plants related to different explant types (epicotyls segments, internodal segments of in vitro germinated plantlets and internodal segments of greenhouse cultivated plants). Data collected on both experiments included the percentage of responsive explants (explants that formed buds), and the number of buds per explant....
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Citrus aurantium; Organogenesis; Epicotyl segment; Internodal segment.
Ano: 2010 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-29452010000100003
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