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Use of F57 bags by the semi-automatic in vitro technique of gas production Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.
Amaral,A.P.S.F.; Coelho,S.G.; Tomich,T.R.; Maurício,R.M.; Gonçalves,L.C.; Rocha e Silveira,S.; Pires Neto,O.S.; Rodrigues,J.A.S..
Os cadinhos filtrantes (porosidade 1) originalmente usados na técnica in vitro semi-automática de produção de gases estabelecida no Laboratório de Produção de Gases da Escola de Veterinária da UFMG podem ocasionar interferências nos estudos de quantificação da degradação de alimentos, principalmente os ricos em amido, devido à obstrução dos poros da placa filtrante pelo material residual após fermentação. Este estudo objetivou avaliar a substituição dos cadinhos filtrantes por sacos F57 (Ankom(r)) visando a realização de experimentos in vitro para descrição da cinética de fermentação e degradação ruminal. Esta substituição causou a redução do peso/volume da amostra incubada e desta forma, interferiu na relação pressão (P) / volume (V) e consequentemente...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: In vitro; Forage evaluation; F57 bags; Gas production.
Ano: 2014 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0102-09352014000601936
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Avaliação de métodos laboratoriais para estimar a digestibilidade e o valor energético de dietas para ruminantes Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.
Silveira,M.F.; Kozloski,G.V.; Mesquita,F.R.; Farenzena,R.; Senger,C.C.D.; Brondani,I.L..
Foi avaliada a acurácia dos métodos laboratoriais para estimar a digestibilidade e o valor energético de dietas para bovinos de corte. As dietas experimentais foram isonitrogenadas e compostas por silagem de milho e 25, 40, 55 ou 70% de concentrado. Os valores de digestibilidade medidos in vivo foram comparados com os obtidos nos ensaios in situ, in vitro e in vitro/gases, e com valores estimados a partir de equações matemáticas baseadas na composição química das dietas. O ensaio in vivo foi realizado com quatro bovinos em delineamento em quadrado latino 4×4. Quatro animais foram usados para o ensaio in situ e quatro corridas foram realizadas para os ensaios in vitro. Não houve interação significativa de dietas versus métodos. As taxas de degradação...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Ruminante; Digestibilidade; Equações; In situ; In vitro; In vivo.
Ano: 2009 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0102-09352009000200021
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Comparação de substratos com diferentes quantidades de carboidratos solúveis utilizando a técnica in vitro semi-automática de produção de gases Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.
Nogueira,U.T.; Maurício,R.M.; Gonçalves,L.C..
Estudou-se a diferença entre a produção de gases (PG) e a degradação da matéria seca (DMS) para substratos com diferentes quantidades de carboidratos solúveis avaliados pela técnica in vitro de produção de gases. Foram utilizados cinco substratos (cana-de-açúcar, silagem de milho, capim-colonião, milho em grão e ração comercial para vacas em lactação) antes e após a retirada parcial dos carboidratos solúveis (lavados). A PG foi maior e a DMS menor para o material lavado. A concentração de carboidratos solúveis influenciou os resultados obtidos pela técnica de produção de gases.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: In vitro; Carboidratos solúveis; Gases; Fibra; DMS.
Ano: 2006 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0102-09352006000400027
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Relação entre pressão e volume para implantação da técnica in vitro semi-automática de produção de gases na avaliação de forrageiras tropicais Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.
Maurício,R.M.; Pereira,L.G.R.; Gonçalves,L.C.; Rodriguez,N.M..
O trabalho teve como objetivo demonstrar o procedimento inicial para a instalação da técnica in vitro semi-automática de produção de gases em diferentes laboratórios, ou seja, estabelecer uma equação que estime o volume (V) de gases produzidos no interior dos frascos por meio de dados de pressão (P) e V, obtidos manualmente durante a fermentação de diferentes substratos. Foram utilizadas sete forrageiras: feno de Cynodon dactylon (tifton 85), Brachiaria brizantha (braquiarão), Neonotonia wightii (soja perene) e silagens de quatro genótipos de sorgo (Sorghum bicolor), que geraram 1036 dados de P e V. A equação relacionando V e P obtida foi: V = -0,004 (s.e. 0,06) + 4,43P (s.e. 0,043) + 0,051 P²(s.e. 0,007), R² = 0,99, a qual permitiu a instalação da técnica...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: In vitro; Produção de gases; Ruminantes; Semi-automatização.
Ano: 2003 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0102-09352003000200014
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Composição bromatológica da silagem de quatro genótipos de girassol, ensilados em cinco diferentes idades de corte Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.
Souza,B.P.S.; Coelho,S.G.; Gonçalves,L.C.; Vieira,F.A.P.; Borges,A.L.C.C.; Rodriguez,N.M.; Rodrigues,J.A.S.; Borges,; Saliba,E.S..
Determinaram-se a composição bromatológica do material original e das silagens de quatro genótipos de girassol (M742, MG4, PM92007 e VDH483) utilizados para produção de grãos, ensilados em diferentes idades de corte após o plantio e aos 90, 97, 104, 111, e 118 dias, e o melhor momento de colheita desses cultivares para ensilagem. Os teores de matéria seca variaram entre as idades e cultivares, sendo observados valores de 12,7% a 42,2% no material original e 11,1% e 40,2% na silagem. Os valores de proteína bruta variaram de 8,3% a 12,6% no material original e de 9,4% a 12,9% na silagem. Foi observada diminuição (P<0,05) nos teores de carboidratos com a ensilagem. Os teores de extrato etéreo do material original e das silagens variaram de 2,2 a 13,3% no...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Girassol; Cultivar; Digestibilidade; Matéria seca; In vitro; Idade de corte; PH.
Ano: 2005 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0102-09352005000800011
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Predição da degradação da matéria seca pelo volume de gases utilizando a técnica in vitro semi-automática de produção de gases Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.
Nogueira,Ú.T.; Maurício,R.M.; Gonçalves,L.C.; Pereira,L.G.R..
Estimou-se a degradação da matéria seca (DMS) via produção de gases (PG) por meio de equações. Foram agrupados dados de volume de gases e DMS de oito forrageiras (Brachiaria brizantha, Brachiaria decumbens, feno de Cynodon spp, silagem de milho, silagem de milheto, sorgo de corte, capim-elefante e cana-de-açúcar) e de milho em grão. Os dados de DMS obtidos em laboratório foram comparados à DMS obtida pelas equações de regressão. Apesar dos altos coeficientes de determinação, os resultados demonstraram a impossibilidade de estimar a DMS via PG pelas equações geral, de dois e de três pontos.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: In vitro; Predição; Gases; Fibra; DMS.
Ano: 2006 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0102-09352006000500028
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Argentinean cultivars of Vitis vinifera grow better than European ones when cultured in vitro under salinity Biocell
Cavagnaro,Juan B.; Ponce,María T.; Guzmán,Javier; Cirrincione,Miguel A..
Argentinean Vitis vinifera cultivars although originated from Europe, have clear ampelographic and genotypic differences as compared with the European cultivars currently used in wine making. In vitro evaluation of salt tolerance has been used in many species. Our hypothesis was that Argentinean cultivars are more tolerant to salinity than European ones. Three European cultivars, Malbec, Cabernet Sauvignon and Chardonnay and four Argentinean cultivars, Cereza, Criolla Chica, Pedro Gimenez and Torrontes Riojano were tested by in vitro culture. Treatments included: 1) Control, 2) 60 mEq/L of a mixture of three parts of NaCl and one part of CaCl2 and 3) 90 mEq/L of the salt mixture. Results from two experiments (I and II) are reported. No differences were...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Vitis vinifera; Cultivars; Salt tolerance; In vitro; G rowth.
Ano: 2006 URL: http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0327-95452006000100001
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In vitro response of date palm (Phoenix dactylifera L.) to K/Na ratio under saline conditions Biol. Res.
Alkhateeb,Suliman A; Alkhateeb,Abdullatif A; Solliman,Mohei EL-Din.
BACKGROUND: Salinity is a serious factor limiting the productivity of agricultural plants. One of the potential problems for plants growing under saline conditions is the inability to up take enough K+. The addition of K+ may considerably improve the salt tolerance of plants grown under salinity. It is assumed that increasing the K+ supply at the root zone can ameliorate the reduction in growth imposed by high salinity. The present study aims to determine whether an increase in the K/Na ratio in the external media would enhance the growth of date palm seedlings under in vitro saline conditions METHODS: Date palm plants were grown at four concentrations of Na + K/Cl (mol/m³) with three different K/Na ratios. The 12 salt treatments were added to modified MS...
Tipo: Journal article Palavras-chave: Date palm; In vitro; Ion relations; K/Na ratio; Salinity.
Ano: 2015 URL: http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716-97602015000100063
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How the carotid body works: Different strategies and preparations to solve different problems Biol. Res.
ZAPATA,PATRICIO; LARRAÍN,CAROLINA.
This is a review of the different experimental approaches developed to solve the problems in our progress towards a comprehensive understanding of how arterial chemoreceptors operate. An analysis is performed of the bases, advantages and limits of the following preparations: studies of ventilatory reflexes originated from carotid bodies (CBs) in the entire animal; recordings of CB chemosensory discharges in situ; CB preparations perfused in situ; CB explants in oculo; CB explants in ovo; CB preparations incubated in vitro; CB preparations superfused in vitro; CB preparations perfused and superfused in vitro; CB tissue slices in vitro; cells acutely dissociated from CBs; CB cells in tissue culture; petrosal ganglia superfused in vitro; petrosal ganglion...
Tipo: Journal article Palavras-chave: Arterial chemoreceptors; Carotid body; Chemosensory activity; Co-cultures; Cultures; In situ; In vitro; Petrosal ganglia; Superfusion.
Ano: 2005 URL: http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716-97602005000400002
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Variação somaclonal em mudas micropropagadas de bananeira, cultivar Pacovan Bragantia
Santos,Cynthia Christina Carvalho dos; Rodrigues,Paulo Hercílio Viegas.
A literatura tem relatado a ocorrência de variação somaclonal em plantas derivadas de cultura de tecidos. Neste trabalho, foi estudada a influência do número de subcultivos na indução de variantes em bananeira, cultivar Pacovan (Musa spp., grupo AAB). Ápices caulinares foram introduzidos e multiplicados in vitro, utilizando-se no estabelecimento o meio de cultura MS com adição de 2,5 mg.L-1 de BAP e nos subcultivos subseqüentes, o meio MS com 4,0 mg.L-1 de BAP para indução de brotações laterais. Foram obtidas gerações com diferentes números de subcultivos (3, 4, 5, 6, 7, 8 e 9), e comparadas com mudas obtidas de rizomas. Observaram-se as plantas obtidas, no total de 426, em condições de campo no Vale do Açu (RN). Para cálculo da porcentagem de variantes...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Produção de mudas; Musa spp; In vitro; Variação somaclonal.
Ano: 2004 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0006-87052004000200005
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Effects of GDF-9 and FSH on mRNA expression for FSH-R, GDF-9 and BMPs in in vitro cultured goat preantral follicles BABT
Leitão,Cintia Camurça Fernandes; Costa,José Jackson do Nascimento; Brito,Ivina Rocha; Magalhães-Padilha,Déborah de Melo; Almeida,Anderson Pinto; Figueiredo,José Ricardo de; van den Hurk,Robert; Silva,José Roberto Viana.
The aim of the present study was to determine the role of GDF-9 and/or FSH on the growth and mRNA expression for FSH-R, GDF-9, and BMPs in goat secondary follicles after culture in vitro. Goat secondary follicles (~200µm) were isolated and cultured for six days in minimum essential medium (MEM) supplemented with GDF-9 (200 ng/mL), FSH (50 ng/mL) or both. At the beginning and end of culture, the follicular diameter was evaluated and compared. The levels of mRNA for GDF-9, FSH-R and BMPs -2, -4, -6, -7 and -15 in cultured follicles were quantified by real time PCR. The results showed that a significant increase of follicle diameter after six days when compared to day 0, but the presence of GDF-9 and FSH did not influence the follicular growth in comparison...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: BMPs; Follicles; GDF-9; In vitro; MRNA.
Ano: 2014 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1516-89132014000200007
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Somatic embryogenesis and plant regeneration in Wedelia calendulacea Less. an endangered medicinal plant BABT
Sharmin,Shamima Akhtar; Alam,Md. Jahangir; Sheikh,Md. Mominul Islam; Sarker,Kanak Kanti; Khalekuzzaman,Muhammad; Haque,Md. Anwarul; Alam,Mohammad Firoz; Alam,Iftekhar.
In this work, plant regeneration via somatic embryogenesis was achieved from leaf and internode derived callus of Wedelia calendulacea, an endangered medicinal plant. Primary callus was induced by culturing leaf disc and internode explant on Murashige and Skoog medium supplemented with 2.0 mg L-1 of 2,4-D under light condition. Transfer of embryogenic callus on a reduced concentration of 2,4-D facilitated somatic embryo development while calluses remained unorganized at the same 2,4-D level. A histological analysis confirmed somatic embryo by revealing the presence of a closed vascular system in the developing embryos and lack of a vascularconnection with surrounding callus tissues. Somatic embryos germinated into plantlets upon transfer on MS medium...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: In vitro; Medicinal plant; Micropropagation; Somatic embryo; Threatened; Wedelia calendulacea.
Ano: 2014 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1516-89132014000300013
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In vitro Callus Induction and Plant Regeneration of Celosia argentea- An Important Medicinal Plant BABT
Bakar,Dalilah Abu; Ahmed,Bakrudeen Ali; Taha,Rosna Mat.
Celosia argentea (Var.) cristata (Amaranthaceae) is a widely cultivated ornamental plant, which has antibacterial, astringent, haemostatic, hypertensive, ophthalmic, and parasitic significance. This study describes a protocol for in vitro callus induction and plant regeneration from leaf and stem explants of C. argentea using Murashige and Skoog (MS) medium. Callus culture was initiated and established from seedling, leaf, and stem explants. Explants were cultured on MS medium supplemented with auxin alone (0.5 mg/L Naphthaleneacetic acid (NAA), 2, 4-Dicholorophenoxyacetic acid (2, 4-D). Green and red compact callus (98%) were induced using MS medium supplemented with 0.5 mg/L NAA and 1.0 mg/L Benzyladenine (BA). Two different concentrations (1.0 mg/L BA +...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Celosia argentea; Amaranthaceae; In vitro; Micropropagation; Callus; Plant regeneration.
Ano: 2014 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1516-89132014000600860
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Cultivation and Biological Characterization of Chicken Primordial Germ Cells BABT
Ji,Meng; Guan,Wei-jun; Gao,Yu-hua; Li,Lu; Bai,Chun-yu; Ma,Yue-hui; Li,Xiang-chen.
The purpose of this work was to investigate the isolation, culture process of chicken gonadal primordial germ cells (PGCs) and study their biological characterization. PGCs were harvested from 5.5-day-old chicken embryonic genital ridges and explanted onto chicken embryonic fibroblasts (CEFs). The results showed that the primary cultivation of chicken PGCs on their own gonadal stroma cells were better than CEFs at first two days for reproduction. The conditioned media supported the growth and colony formation of PGCs for a prolonged time in vitro and maintained a normal diploid karyotype, which were positively stained by alkaline phosphatase (AKP), periodic acid Schiff (PAS) and reacted with anti-SSEA-1, SSEA-3, Oct4, Blimp1 and Sox2. Real-time PCR showed...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Chicken; Primordial germ cells; Biological characteristics; In vitro.
Ano: 2016 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1516-89132016000100401
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Physiological Responses of Callus from Gerbera jamesonii Bolus ex. Hook f. to Gamma Irradiation BABT
Hasbullah,Nor Azlina; Taha,Rosna Mat; Saleh,Azani; Mohamed,Normadiha.
In the present study, in vitro mutagenesis techniques were applied to investigate the effects of gamma irradiation at 0, 10, 20, 30, 40, 50 and 60 Gy on physiological changes in callus of Gerbera jamesonii Bolus ex. Hook f. Biochemical changes in chlorophyll and soluble protein content of pre- and post- irradiated Gerbera callus were studied. Non-irradiated callus demonstrated the highest amount of chlorophyll content as compared to callus irradiated at 10, 20, 30, 40, 50 and 60 Gy. In addition, the amount of chlorophyll b was relatively higher than chlorophyll a in both the irradiated and non-irradiated callus, except for callus irradiated at 10 Gy. Biochemical differentiation based on total soluble protein content revealed gradual reduction after day 9...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Gerbera jamesonii; Gamma irradiation; Callus; In vitro; Chlorophyll; Soluble protein.
Ano: 2012 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1516-89132012000300012
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Micropropagation of an elite F1 watermelon (Citrullus lanatus) hybrid from the shoot tip of field grown plants BABT
Khalekuzzaman,Mohammad; Khatun,Marufa; Rashid,Mohammad Harunur; Sheikh,Mominul Islam; Sharmin,Shamima Akhtar; Alam,Iftekhar.
The aim of this work was to develop a protocol for rapid micropropagation of an elite F1 hybrid watermelon cultivar using shoot tip of field-grown plants. Maximum frequency (73%) of shoot tip showed growth response in MS medium supplemented with 5 mg l-1 benzyl adenine (BA) and 0.1 mg l-1 indole-3 acetic acid (IAA). Upon transfer to cytokinin-enriched medium, the cultures produced multiple shoots and 2.0 mg l-1 BA was optimum in this respect. Addition of gibberellic acid (GA3) in the multiplication medium resulted in better growth of shoots. Rooting rate was 100% when shoots were obtained from second subculture were cultured in medium with 1.0 mg l-1 indole-3 butyric acid (IBA). The shoots produced more roots with increasing number of subcultures. About...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: In vitro; Watermelon; Micropropagation; Hybrid vigor.
Ano: 2012 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1516-89132012000300002
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Light microscope observation of circulating human lymphocytes cultured in vitro BABT
Oliveira,Naila Francis Paulo de; Dolder,Mary Anne Heidi; Genari,Selma Candelária.
The purpose of this work was to study the isolation and a light microscopy technique for cultured lymphocytes. Blood samples were obtained by venipuncture with an anticoagulant added and centrifuged in a Percoll density gradient to separate the leukocytes. Lymphocytes were placed in 25 cm ³ tissue culture flasks at 37ºC. After culturing, they were fixed and stained with the methods used for blood smears. Results showed that not all fixing solutions and stains were an equally good choice for cultured lymphocytes.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Blood; In vitro; Lymphocytes; Microscopy; Morphology; Percoll.
Ano: 2010 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1516-89132010000500013
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Antitumor activity of C-phycocyanin from Arthronema africanum (Cyanophyceae) BABT
Gardeva,Elena; Toshkova,Reneta; Yossifova,Liliya; Minkova,Kaledona; Ivanova,Natalia; Gigova,Liliana.
Pure C-phycocyanin (C-PC) was isolated from Arthronema africanumto evaluate its potential antitumor effects in vivo and in vitro. Experimental myeloid Graffi tumor in hamsters was used as a model. The cell proliferation assay showed that C-PC treatment, at concentration of 100 µg mL-1 for 24 h, significantly inhibited the growth of Graffi tumor cells (51.4% viability). Agarose gel electrophoresis of the genomic DNA of treated cells displayed time-and concentration-dependent fragmentation pattern, typical for apoptosis. Apoptotic process was related to the increase in cellular manganese and copper/zinc superoxide dismutases and glutathione reductase activities, coupled with a low catalase activity. In vivo C-PC administration (5.0 mg kg-1 body weight)...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Antitumor activity; Arthronema africanum; In vivo; In vitro; C-pycocyanin; Myeloid Graffi tumor.
Ano: 2014 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1516-89132014000500675
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Avaliação das condições de maturação oocitária e do efeito do reprodutor na produção in vitro de embriões bovinos Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci.
COELHO,Lia de Alencar; ESPER,Cesar Roberto; GARCIA,Joaquim Mansano; VANTINI,Roberta; SILVA FILHO,Izaltino Rocha; ALMEIDA Jr.,Ivo Luis.
Avaliaram-se as condições de cultura para maturação dos oócitos (Exp. I) e o efeito do reprodutor (Exp. II) sobre as taxas de clivagem (TC) e de mórulas e blastocistos (MO/BL) produzidos in vitro. Oócitos imaturos foram submetidos a maturação in vitro sob diferentes condições: meio B-199, acrescido de 5% de soro de vaca em estro (SVE), 5% de soro fetal bovino (SFB) e células da granulosa (T1/Exp. I) ou meio B-199, acrescido de 10% de SFB, 14 UI/ml de PMSG e 7 UI/ml de hCG (T2/Exp I). Após 24 h de cultura, os oócitos maturos foram inseminados com sêmen descongelado de dois reprodutores (R1 e R2 /Exp. II) e, após 48 h de incubação, os embriões de 2 e 4 células foram transferidos para placas de cultivo in vitro, onde permaneceram em cultura por mais 9 dias....
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Maturação; Fertilização; In vitro; Oócitos; Bovinos.
Ano: 1998 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1413-95961998000300005
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Prostate-specific membrane antigen can promote in vivo osseous metastasis of prostate cancer cells in mice BJMBR
Zhao,Liang-Yun; Mao,Xiao-Peng; Chao,Kai-Yuan; Guo,Sheng-Jie; Qiu,Shao-Peng.
Reports remain insufficient on whether and how prostate-specific membrane antigen (PSMA) can influence in vivo osseous metastasis of prostate cancer (PCa). In the present study, the authors induced stable expression of PSMA in mouse PCa cell line RM-1. In vivo osseous metastasis was induced in 37 6-week-old female C57BL/6 mice weighing 22.45 ± 0.456 g. RM-1 cells were actively injected into the femoral bone cavity, leading to bilateral dissymmetry of bone density in the femoral bone. Tumor cells were also detected in bone tissue by pathological examination. The impact on bone density was demonstrated by the significant difference between animals injected with RM-PSMA cells (0.0738 ± 0.0185 g/cm²) and animals injected with RM-empty plasmid cells (0.0895 ±...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Prostate carcinoma; Prostate-specific membrane antigen; In vitro; Osseous metastasis.
Ano: 2012 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-879X2012000800008
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