|
|
|
|
| |
|
|
| Кузнецов, А. В.; Пиркова, А. В.; Дворянчиков, Г. А.; Панферцев, Е. А.; Гаврюшкин, А. В.; Кузнецова, И. В.; Ерохин, В. Е.. |
| Изучали возможность переноса экзогенных ДНК сперматозоидами мидии Mytilus galloprovincialis Lam. в яйцеклетки при использовании ряда методов трансфекции и без них. Оценивали уровень оплодотворяемости яйцеклеток спермиями, обработанными чужеродной ДНК, и развитие личинок на ранних стадиях эмбриогенеза. Отмечено негативное действие контакта спермиев мидии с экзогенной ДНК на оплодотворение и последующее развитие эмбрионов. Перенос плазмид pCMVlacZ и pMTbGH в икру зарегистрирован только в групповых скрещиваниях. С помощью ПЦР чужеродные последовательности ДНК обнаружены в личинках на стадии велигера через 48 ч после оплодотворения. Интенсивный сигнал зарегистрирован в случае электропорации спермиев в 10% ДМСО (С=20 мкФ, R=150 Ом,... |
| Tipo: Journal Contribution |
|
| Ano: 2000 |
URL: http://repository.ibss.org.ua/dspace/handle/99011/1185 |
| |
|
| |
|
|
| Ерохин, В. Е.; Кузнецов, А. В.. |
| Предложена гипотеза о возможной информационной и регуляторной роли высокомолекулярных компонентов РОВ. В модельных экспериментах показан захват экзогенной ДНК сперматозоидами мидии Mytilus galloprovincialis Lam. Установлен факт переноса этой ДНК в яйцеклетку при оплодотворении, с последующей экспрессией трансгена в плавающих личинках. Экзогенная ДНК проникала непосредственно в яйцеклетки мидий путём естественной трансфекции сперматозоидов, или при их обработке комплексом ДНК:белок:липиды. В составе комплекса ДНК: белок: липиды химерные белки V-GAL4 и в большей мере VGCN4 обеспечивают доставку плазмиды pCMVgfp (bind) в ядро сперматозоида мидии, что приводит к экспрессии GFP-протеина в личинках после оплодотворения. Сделано заключение, что входящие в состав... |
| Tipo: Journal Contribution |
|
| Ano: 2009 |
URL: http://repository.ibss.org.ua/dspace/handle/99011/1031 |
| |
|
|
| Кузнецов, А. В.; Ерохин, В. Е.. |
| Компетентные сперматозоиды черноморской мидии Mytilus galloprovincialis захватывают из окружающей среды молекулы плазмидной ДНК и частично разрушают их. Часть ДНК сохраняется в малодоступном для ДНКазы I компартменте. Через 15 мин инкубации спермин связывают до 60 % экзогенной ДНК (60 нг ДНК/108 клеток). Емкость одного спермия мидии составляет 200 молекул плазмиды pGEM4Z или 550 т.п.н. экзогенной ДНК. В отличие от предварительной обработки спермиев трипсином, ДМСО способствует проникновению посторонней ДНК в мужские гаметы. |
| Tipo: Journal Contribution |
|
| Ano: 2001 |
URL: http://repository.ibss.org.ua/dspace/handle/99011/964 |
| |
|
|
|
