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High sensitive phenol-sulfuric acid colorimetric method OAK
竹内, 宏治; 井熊, 武志; 高橋, 祐司; 匂坂, 慶子; 髙澤, 俊英; TAKEUCHI, Kouji; IKUMA, Takeshi; TAKAHASHI, Yuji; SAGISAKA, Keiko; TAKASAWA, Toshihide.
Palavras-chave: フェノール-硫酸法; 高感度フェノール-硫酸法; 全糖定量法.
Ano: 2001 URL: http://ir.obihiro.ac.jp/dspace/handle/10322/1253
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常温性菌核病菌 Sclerotinia sclerotiorum 由来のポリガラクツロナーゼⅠの単離 OAK
高橋, 裕司; 井熊, 武志; 匂坂, 慶子; 斉藤, 泉; 髙澤, 俊英; TAKAHASHI, Yuji; IKUMA, Takeshi; SAGISAKA, Keiko; SAITO, Izumi; TAKASAWA, Toshihide.
CM-Toyopearl陽イオン交換カラムクロマトグラフィーおよびSephacryl S-200ゲルろ過カラ ムクロマトグラフィーによって、常温性菌核病菌Sclerotinia sclerotiorumの20℃培養抽出物 のポリガラクツロナーゼ活性画分からポリガラクツロナーゼⅠを単離した。ポリガラクツ ロナーゼⅠ精製標品(P4-4-2)の比活性は3 662U/mgであり、粗抽出液から全体として116倍に 精製した。精製標品はポリアクリルアミドゲル電気泳動によって、均一であることが示さ れた。また、SDS存在下ポリアクリルアミドゲル電気泳動によって本酵素の分子質量は 39.8±1.10kDa(S.E.)、さらに等電点電気泳動によって本酵素の等電点はpH8.70と見積もられた。 Polygaracturonase􀑏has been isolated from the mesophilic white mold Sclerotinia Sclerotiorum by cation-exchange chromatography on a column of CM-Toyopearl followed by gel filtration on a column of Sephacryl S-200. Purified enzyme preparation(P4-4-2) had a specific activity of 3 662 units per mg of protein, that is, 116-fold purification over the crude extract of the wheat bran culture of the mesophilic fungus S....
Palavras-chave: Sclerotinia sclerotiorum; 常温菌; 菌核病菌; ポリガラクツロナーゼ; 細胞壁分解酵素; Mesophile; White mold; Polygalacturonase; Cell wall degrading enzyme.
Ano: 2002 URL: http://ir.obihiro.ac.jp/dspace/handle/10322/106
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Isolation of polygalacturonase I from the culture of the psychrophilic snow mold Sclerotinia borealis OAK
高橋, 裕司; 井熊, 武志; 匂坂, 慶子; 斉藤, 泉; 髙澤, 俊英; TAKAHASHI, Yuji; IKUMA, Takeshi; SAGISAKA, Keiko; SAITO, Izumi; TAKASAWA, Toshihide.
Palavras-chave: Sclerotinia borealis; 好冷菌; 雪腐菌核病菌; ポリガラクツロナーゼ; 細胞壁分解酵素; Psychrophile; Snow mold; Cell wall degrading enzyme; Polygalacturonase.
Ano: 2002 URL: http://ir.obihiro.ac.jp/dspace/handle/10322/120
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Fe3+鉄試薬を用いた高感度還元糖定量法 OAK
井熊, 武志; 竹内, 宏治; 高橋, 祐司; 匂坂, 慶子; 高澤, 俊英; IKUMA, Takeshi; TAKEUCHI, Kouji; TAKAHASHI, Yuji; SAGISAKA, Keiko; TAKASAWA, Toshihide.
Palavras-chave: 還元糖定量法; 高感度定量法; 鉄試薬比色定量法; Reducing sugar determination; High sensitive determination; Colorimetric determination.
Ano: 2001 URL: http://ir.obihiro.ac.jp/dspace/handle/10322/1257
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Coomassie brilliant blue G250 色素結合法による高感度タンパク質定量法 OAK
井熊, 武志; 竹内, 宏治; 匂坂, 慶子; 髙澤, 俊英; IKUMA, Takeshi; TAKEUCHI, Kouji; SAGISAKA, Keiko; TAKASAWA, Toshihide.
Coomassie brilliant blue G-250 (CBB)を用いてタンパク質定量用高感度試薬の調製を試みた。 まず、Bradford reagent (0.01%(w/v) CBB-4.75%(v/v)エタノール-8.5%(w/v)リン酸)を使用し、 Bradford (1976)の高感度発色系(0.1mLタンパク質溶液、1mL Bradford reagent)によってBSA (0-9μg)を標準物質として用いてBradford法を検証した。Bradford reagent (Bradford 1976)は、 調製直後から経日保存中にCBB沈殿を生じ、使用する度毎にろ過操作を必要とし、従って その度に標準曲線作成実験を行わなければならず、実験操作上煩雑で、この欠点は Bradford reagent に改良を加えても解決できなかった。そこで、保存中にCBB沈殿を生じず、 安定なCBB reagentの調製を試み、充分使用に耐えるCBB reagentを開発した。CBB reagentの 濃度は、0.025%(w/v) CBB-12.5%(v/v)メタノール-70.83%(w/v)リン酸である。CBBによるタン パク質の発色系は、0.8mLタンパク質溶液(0-9μg protein)、0.2mL CBB reagentで行った。 The high sensitive reagent using Coomassie brilliant blue G250 (CBB) for protein microassay has been prepared. At first, the high sensitive coloration system (0.1mL protein solution and...
Palavras-chave: CBB 色素結合法; 色素結合法; 蛋白質定量法; CBB dye-binding assay; Dye-binding assay; Protein assay; CBB G250.
Ano: 2002 URL: http://ir.obihiro.ac.jp/dspace/handle/10322/107
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Polygalacturonase activity of the wheat bran culture of the psychrophilic snow mold Seclerotinia br\orealis. Apparently irreversible inhibition of enzyme activity by ammonium sulfate OAK
井熊, 武志; 高橋, 裕司; 匂坂, 慶子; 斉藤, 泉; 髙澤, 俊英.
Palavras-chave: ポリガラクツロナーゼ; 活性阻害; 抗カオトロピックイオン; Psychrophile; Sclerotinia borealis.
Ano: 2003 URL: http://ir.obihiro.ac.jp/dspace/handle/10322/110
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Cold adaptation of polygalacturonase activity from the culture of the psychrophilic snow mold Sclerotinia borealis OAK
竹内, 宏治; 井熊, 武志; 匂坂, 慶子; 斉藤, 泉; 髙澤, 俊英; TAKEUCHI, Kouji; IKUMA, Takeshi; SAGISAKA, Keiko; SAITO, Izumi; TAKASAWA, Toshihide.
Palavras-chave: ポリガラクツロナーゼ; 低温適応; 好冷菌; Sclerotinia borealis; Sclerotinia sclerotiorum; Polygalacturonase; Cold adaptation; Psychrophile.
Ano: 2002 URL: http://ir.obihiro.ac.jp/dspace/handle/10322/121
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