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Use of the heteroduplex mobility assay and cell sorting to select genome sequences of the CCR5 gene in HEK 293T cells edited by transcription activator-like effector nucleases Genet. Mol. Biol.
Nerys-Junior,Arildo; Costa,Lendel C.; Braga-Dias,Luciene P.; Oliveira,Márcia; Rossi,Átila D.; Cunha,Rodrigo Delvecchio da; Gonçalves,Gabriel S.; Tanuri,Amilcar.
Engineered nucleases such as zinc finger nucleases (ZFN) and transcription activator-like effector nucleases (TALEN) are one of the most promising tools for modifying genomes. These site-specific enzymes cause double- strand breaks that allow gene disruption or gene insertion, thereby facilitating genetic manipulation. The major problem associated with this approach is the labor-intensive procedures required to screen and confirm the cellular modification by nucleases. In this work, we produced a TALEN that targets the human CCR5 gene and developed a heteroduplex mobility assay for HEK 293T cells to select positive colonies for sequencing. This approach provides a useful tool for the quick detection and easy assessment of nuclease activity.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: CCR5; Genome editing; Gene knockout; TALEN; HMA.
Ano: 2014 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1415-47572014000100018
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