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RT-PCR-ELISA for detection of Apple stem grooving virus in apple trees Trop. Plant Pathol.
Marinho,Vera Lúcia A.; Daniels,Julio; Kummert,Jean; Chandelier,Anne; Lepoivre,Philippe.
A method to detect Apple stem grooving virus (ASGV) based on reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was developed using primers ASGV4F-ASGV4R targeting the viral replicase gene, followed by a sandwich hybridisation, in microtiter plates, for colorimetric detection of the PCR products. The RT-PCR was performed with the Titan™ RT-PCR system, using AMV and diluted crude extracts of apple (Malus domestica) leaf or bark for the first strand synthesis and a mixture of Taq and PWO DNA polymerase for the PCR step. The RT-PCR products is hybridised with both a biotin-labelled capture probe linked to a streptavidin-coated microtiter plate and a digoxigenin (DIG)-labelled detection probe. The complex was detected with an anti-DIG conjugate labelled...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Colorimetric detection of ASGV; Prunus armeniaca.
Ano: 2003 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-41582003000400005
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