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Auxin independent1 (Axi1) as an endogenous gene for copy number determination in transgenic tobacco. Repositório Alice
LOPES, S. da S.; COSTA, J. F. da V.; BARROS, B. de A.; CARNEIRO, A. A.; SOUSA, S. M. de.
Determining the copy number is important because it can greatly influence the expression level and genetic stability of transgenes. This study aimed to establish a methodology that can estimate the transgene copy number in tobacco (Nicotiana tabacum) using the Auxin independent1 (Axi1) gene as an endogenous control. Tobacco c.v. Petit Havana plants were transformed via Agrobacterium tumefaciens with a pMCG1005 vector that contained Bar as a selective gene. Oligonucleotide efficiency was determined and a qPCR using the 2-ΔCt and 2-ΔΔCt methods was performed. Bar was the target gene and Axi1 was the endogenous control in five transgenic tobacco events. The results showed that the Axi1 gene was donated by the maternal parent N....
Tipo: Artigo em periódico indexado (ALICE) Palavras-chave: Cópia transgênica; Tabaco; Controle endógeno; Planta Transgênica; Gene; Nicotiana Tabacum.
Ano: 2020 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1123250
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Determinação do número de cópias de transgenes em eventos de tabaco por PCR em tempo real. Infoteca-e
COSTA, J. F. da V.; LOPES, S. da S.; BARROS, B. de A.; CARNEIRO, A. A.; SOUSA, S. M. de.
Por causa da facilidade de regeneração in vitro e de transformação via agrobactéria, o tabaco tem sido considerado um sistema modelo ideal para a transferência de genes e estudos genético-moleculares. Métodos eficientes para caracterizar plantas transgênicas são importantes para entender o estado fisiológico do transformante. A técnica de PCR em tempo real pode ser usada para determinar a zigosidade em plantas transgênicas e o número de cópias do transgene. Em plantas transgênicas, o número de cópias do transgene pode influenciar o nível de expressão e a estabilidade genética do gene alvo, o que torna a estimativa do número de cópias do transgene extremamente importante na pesquisa com culturas geneticamente modificadas. O gene Axi1, envolvido na ação das...
Tipo: Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento (INFOTECA-E) Palavras-chave: Transgênico; Planta Transgênica; Engenharia Genética.
Ano: 2018 URL: http://www.infoteca.cnptia.embrapa.br/infoteca/handle/doc/1097104
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Determinação do número de inserções de transgene em plantas transgênicas de tabaco por reação da cadeia da polimerase em tempo real. Repositório Alice
COSTA, J. F. da V.; LOPES, S. da S.; BARROS, B. de A.; CARNEIRO, A. A.; SOUSA, S. M. de.
Em plantas transgênicas, o número de cópias do transgene pode influenciar o nível de expressão e a estabilidade genética do gene alvo, o que torna a estimativa do número de cópias do transgene extremamente importante na pesquisa com culturas geneticamente modificadas. O gene Axi1, envolvido na ação das auxinas, já foi utilizado anteriormente como controle endógeno na determinação de número de inserções de trangenes de tabaco, no entanto não foi confirmado se esse gene é cópia única. Portanto, o objetivo desse trabalho foi estabelecer uma metodologia com PCR em tempo real (qPCR) para determinar o número de cópias em plantas transgênicas de tabaco, utilizando o gene Axi1 como controle endógeno. Plantas de tabaco (Petit havana)...
Tipo: Artigo em periódico indexado (ALICE) Palavras-chave: Transgênico; Axi1; Nicotiana Tabacum; Fósforo.
Ano: 2019 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1115023
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