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Análise da expressao gênica do VEGF (vascular Endothelial growth factor) em placentas bovinas de animais clonados, produzidos in vitro e in vivo, Pelo método de rt-pcr semiquantitativo Repositório Alice
LANDIM, JR, L. P.; FERREIRA, C. R.; PERECIN, F.; NICIURA, S. C. M.; YAMAZAKI, W.; MIGLINO, M. A.; GARCIA, J. M..
O sucesso da produção de embriões por fecundação in vitro ou transferência nuclear depende de uma variedade de fatores, dos quais a formação de uma incompleta vascularização placentária representa uma das principais causas de perda gestacional precoce. Neste trabalho, avaliou-se a expressão relativa de Fator de Crescimento Endotélio-vascular (VEGF), um potente agente vasculogênico, em placentas de bovinos clonados por transferência nuclear (NT), produzidos por fecundação in vitro (FIV), ou por monta natural (MN). Verificou-se um decréscimo altamente significativo de expressão de VEGF nas placentas dos animais produzidos in vitro, quando comparados aos animais MN (1,32a; 0,21b; 0,31b, respectivamente para MN, FIV e NT, p<0,05; teste de Duncan), sugerindo...
Tipo: Separatas Palavras-chave: Análise de expressão génica; Semiquantitativo; Placentas Bovinas; VEGF; RT-PCR.; Clone..
Ano: 2006 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/256248
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Avaliação da influência da ovalbumina (OVA) como suplemento protéico durante a etapa de fecundação in vitro de oócitos bovinos. Repositório Alice
TETZNER, T. A. D.; SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; OLIVEIRA, C. S.; MELO, D. S.; MONTEIRO, F. M.; VANTINI, R.; GARCIA, J. M..
A produção in vitro (PIV) de embriões é considerada como a terceira geração de biotecnologias (THIBIER et aI., Biology ofthe Cell, v.75, p.173-] 80, ] 992). Das etapas da PIV, a fecundação é um processo complexo que resulta na união de dois gametas, promovendo a restauração do número de cromossomos para o começo do desenvolvimento de um novo indivíduo (GORDON, Cambridge University Press, p.30-]42, ]994). O presente trabalho objetivou avaliar os efeitos da OVA na etapa de fecundação in vitro (FIV). Os oócitos foram maturados in vitro (MIV) em meio TCM ]99 com sais de Earle, suplementado de acordo com os tratamentos: SFB (]O% SFB; Crypionlll), BSA (Inlablll; 4mg/mL BSA), OVA (]nlablll; 4mg/mL OVA), e ],OI.1g/mL de FSH (Plusetlll, Calier), 501.1g/mL de hCG...
Tipo: Separatas Palavras-chave: Embriões; Bovinos; Ovalbumina.; Produção..
Ano: 2007 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/48088
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Caracterização do genótipo mitocondrial de um rebanho da raça bovina Canchim. Repositório Alice
NICIURA, S. C. M.; FERREIRA, C. R.; CHIARATTI, M. R.; MEIRELLES, F. V.; REGITANO, L. C. de A.; ALENCAR, M. M. de; BARBOSA, P. F..
A formação da raça bovina Canchim, 5/8 Charolês + 3/8 Zebu, cuja base genética foi ampliada pelo desenvolvimento de três linhagens (antiga, nova e cruzada), buscou aproveitar o vigor híbrido e complementar a alta velocidade de crescimento e boa qualidade de carne do Charolês (Europeu) à adaptação aos trópicos do Zebu. O genótipo mitocondrial (mtDNA) é controlado por herança materna e suas variações podem levar a diferenças fenotípicas para características produtivas. No Canchim, o tipo de mtDNA (Europeu/taurus ou Zebu/indicus) não era conhecido. Neste trabalho, animais da raça Canchim do rebanho da Embrapa Pecuária Sudeste foram caracterizados por meio da genotipagem do mtDNA por PCR alei o-específico. Pela avaliação genealógica, foram determinadas as 173...
Tipo: Separatas Palavras-chave: Bovinos; DNA micocondrial; Herança materna; PCR alelo-específico.; Gado de Corte..
Ano: 2008 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/33355
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Characterization of mitochondrial genotypes in the foundation herd of the Canchim beef cattle breed. Repositório Alice
MÉO, S. C.; FERREIRA, C. R.; CHIARATTI, M. R.; MEIRELLES, F. V.; REGITANO, L. C. de A.; ALENCAR, M. M. de; BARBOSA, P. F..
The Canchim (5/8 Charolais + 3/8 Zebu) beef cattle breed was developed at Southeast-Embrapa Cattle to take advantage of hybrid vigor and to combine the higher growth rate and beef quality of Charolais with tropical adaptations of Zebu. The development of three lineages (old, new, and crossbred) has increased its genetic basis. The genotypic origin (Bos taurus or Bos indicus) of the mitochondrial DNA (mtDNA) of the Canchim breed was unknown. We characterized the mtDNA genotype of this founder herd by allele-specific polymerase chain reaction. The 173 founder Zebu females (62 Indubrasil, 3 Guzerat, and 108 Nellore) and their 6749 offspring were identified. The frequency of B. indicus mtDNA ranged from 1.15 to 2.05% among the descendants (n = 6404) of each...
Tipo: Artigo de periódico Palavras-chave: Allele specific polymerase chain reaction; Bovine; Maternal inheritance; Mitochondrial DNA.
Ano: 2009 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/256253
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Desenvolvimento embrionário, visualização de pronúcleos e transferência pronuclear após centrifugação de zigotos bovinos em meio com citocalasina. Infoteca-e
NICIURA, S. C. M.; FERREIRA, C. R.; PERECIN, F.; YAMAZAKI, W.; LEAL, C. L. M.; GARCIA, J. M.; MEIRELLES, F. V..
bitstream/CPPSE/17544/1/Boletim11.pdf
Tipo: Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento (INFOTECA-E) Palavras-chave: Desenvolvimento embrionário - Pronúcleos - Zigotos; Bovinos; Citocalasina; Bovino; Embriogenese; Nucleo; Fecundacao animal.
Ano: 2007 URL: http://www.infoteca.cnptia.embrapa.br/infoteca/handle/doc/37496
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Efeito do protocolo de sincronização celular na produção de clones bovinos. Repositório Alice
PERECIN, F.; YAMAZAKI, W.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; BIASE, F. H.; MERIGHE, G. K. F.; SARAIVA, N. Z.; TETZNER, T. A. D.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M..
Os métodos de sincronização da célula doadora de núcleo para uso em clonagem baseiam-se no bloqueio reverslvel do ciclo celular em pontos especlficos. Idealmente, espera-se que esse bloqueio não provoque prejulzo à viabilidade do embrião reconstituldo após a transferência de núcleo. Este trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência do processo de clonagem (taxa de eletrofusão, produção de blastocistos e estabelecimento de prenhez) a partir de dois protocolos de sincronização celular: privação de soro fetal bovino (SFB) ou cultivo celular até confluência. Oócitos bovinos foram recuperados por aspiração folicular postmortem e maturados in vitro (MIV) por 18h em TCM-199 suplementado com 10% de SFB, 1 ug/mL FSH, 50ug/ mL hCG, 1 ug/mL estradiol, 0,2mM...
Tipo: Separatas Palavras-chave: Efeito do protocolo; Sincronização celular; Produção de clones bovinos.
Ano: 2007 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/48092
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Efeitos da demecolcina sobre a cinética da maturação nuclear e a migração dos grânulos corticais em oócitos bovinos. Repositório Alice
SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; MÉO, S. C.; FERREIRA, C. R.; TETZNER, T. A. D.; VANTINI, R.; GARCIA, J. M..
A demecolcina é um agente anti-mitótico desestruturador de microtúbulos utilizado para enucleação química de oócitos destinados à transferência nuclear (TN). O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da exposição de oócitos bovinos à demecolcina sobre a maturação nuclear e a distribuição de grânulos corticais (GC), utilizada como indício de maturação citoplasmática. Oócitos bovinos maturados in vitro (MIV) em TCM 199 suplementado com 10% SFB, 1,0µg/mL de FSH, 50µg/mL de hCG, 1,0µg/mL de estradiol, 0,20mM de piruvato e 83,4µg/mL de amicacina, durante 24 horas receberam tratamento com demecolcina nas concentrações: 0 (controle) e 0,05ìg/mL (tratado). O grupo tratado foi exposto à demecolcina a partir de 12 horas de MIV e avaliado quanto à maturação...
Tipo: Separatas Palavras-chave: Oócitos bovinos; Grânulos corticais; Efeitos da demecolcina; Cinética; Maturação nuclear.
Ano: 2007 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/48118
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Efeitos da substituição do soro fetal bovino (SFB) e da albumina sérica bovina (BSA) pela ovalbumina (OVA) na produção in vitro de embriões bovinos. Repositório Alice
TETZNER, T. A. D.; SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; OLIVEIRA, C. S.; MELO, D. S.; MONTEIRO, F. M.; VANTINI, R.; GARCIA, J. M..
As biotecnologias aplicadas à reprodução animal vêm causando grandes impactos à produção animal, principalmente nas últimas duas décadas. Historicamente, o meio de cultivo contém SFB ou BSA, que são preparados e purificados a partir de produtos derivados sangUíneos e apresentam altos riscos de contaminação por patógenos, como vírus: BHV-I e BVDV (GUERIN et ai., Buli Academic Veterinarian France, v.61, po513-520, 1988), e prions: BSE (KRISHER et ai., Biology of Reproduction, v.60, p.1345-1352, 1999). De acordo com Barlian et ai. (Cell Biology Intemational, v.17, p.677-684, 1993), a OVA é um suplemento protéico não aparentado ao BSA, mas que -possui a capacidade de manter a proliferação celular. Além disso, por ser de origem heteróloga, os riscos de...
Tipo: Separatas Palavras-chave: Soro fetal bovino (SFB); Albumina sérica bovina (BSA); Ovalbumina (OVA); Produção in vitro; Embriões bovinos.
Ano: 2007 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/48089
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Effect of dietary supplementation of Nelore heifers with polyunsaturated fatty acids on cryotolerance and membrane lipid profile of fresh and vitrified in vitro-produced embryos. Repositório Alice
LEÃO, B. C. S.; ROCHA-FRIGONI, N. A. S.; NOGUEIRA, E.; CABRAL, E. C.; FERREIRA, C. R.; EBERLIN, M. N.; ACCORSI, M. F.; NEVES, T. V.; MINGOTI, G. Z..
The aim of this study was to evaluate the development and cryotolerance of IVP embryos from oocytes recovered from Nelore heifers (n = 16) fed with control diet (Control group) or fed with rumen-protected PUFA (Megalac-E®), for at least 60 days (Fat group).
Tipo: Separatas Palavras-chave: Bovine; Bovino; Espectrometria; Cryopreservation; Mass spectrometry; Cattle.
Ano: 2016 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1055134
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Embryo mitochondrial DNA depletion is reversed during early embryogenesis in cattle. Repositório Alice
CHIARATTI, M. R.; BRESSAN, F. F.; FERREIRA, C. R.; CAETANO, A. R.; SMITH, L. C.; VERCESI, A. E.; MEIRELLES, F. V..
Tipo: Separatas Palavras-chave: Bovine; Developmental biology; Embryo; Preimplantation; Mitochondria.
Ano: 2010 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/873474
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Expressão de DNA metiltransferases em blastocistos bovinos produzidos in vivo e in vitro. Repositório Alice
PERECIN, F.; YAMAZAKI, W.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; BIASE, F. H.; MERIGHE, G. K. F.; SARAIVA, N. Z.; TETZNER, T. A. D.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M..
Nos mamiferos, a metilação do DNA é essencial na regulação da expressão gênica e na diferenciação celular. Uma proporção elevada de embriões produzidos por transferência nuclear (TN) é incapaz de estabelecer e sustentar a gestação a termo. Há grande consenso que alterações epigenéticas, primariamente causadas por alterações nos padrões de metilação do DNA, resultam em expressão gênica anormal em embriões e fetos clonados, tomando os indices de sucesso da clonagem frustrantes. Este trabalho objetivou analisar os padrões de expressão das DNA metiltransferases (DNMT) I, 3A e 3B em blastocistos bovinos produzidos in vivo (grupo IV) ou in vilro por FIV (grupo FlV) e transferência nuclear a partir de fibroblastos submetidos à privação de soro fetal bovino (SFB)...
Tipo: Separatas Palavras-chave: Expressão de DNA; Metiltransferases; Blastocistos bovinos; Produzidos in vivo e in vitro.
Ano: 2007 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/48096
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Imprinted gene expression in in vivo- and in vitro-produced bovine embryos and chorio-allantoic membranes. Repositório Alice
PERECIN, F.; NICIURA, S. C. M.; FERREIRA, C. R.; MERIGHE, G. K. F.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M..
Cloning by nuclear transfer is often associated with poor results due to abnormal nuclear reprogramming of somatic donor cells and altered gene expression patterns. We investigated the expression patterns of imprinted genes IGF2 and IGF2R in 33- to 36-day bovine embryos and chorio-allantoic membranes derived from in vivo- and in vitro-produced embryos by somatic cell nuclear transfer (SCNT), parthenogenetic activation, and in vitro fertilization (IVF). There was a lower IGF2 expression rate in the SCNT (0.19) and parthenogenetic (0.02) groups when compared to in vivo and IVF embryos (2.01; P < 0.05). In the chorio-allantoic membranes, IGF2 showed a baseline expression pattern (P < 0.05) in parthenotes (0.001) when compared to in vivo, IVF (3.13), and...
Tipo: Separatas Palavras-chave: IGF2; IGF2R; Nuclear transfer.; Cattle; Epigenetics; Genomic imprinting..
Ano: 2009 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/256254
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Karyoplast exchange between strontium- and 6-DMAP-parthenogenetically activated zygotes of cattle. Repositório Alice
MEO, S. C.; FERREIRA, C. R.; PERECIN, F.; SARAIVA, N. Z.; TETZNER, T. A. D.; YAMAZAKI, W.; LEA, C. L. V.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M..
Ooplasmic factors drive nuclear organization after fertilization and are also important for re-programming in nuclear transfer procedures, in which artificial activation is essential for reconstructed embryos to progress in development. The present research evaluated the effect of pronuclear transfer (PT) between zygotes parthenogenetically activated with ionomycin followed by strontium (S) or 6-DMAP (D) on early embryonic development. PT was performed in the same zygote to obtain embryos in control groups (S-PT and D-PT) and between zygotes activated with S and D to achieve embryos with differentially activated cytoplasm (C) and nucleus (N) (SCDN and DCSN). PT procedure did not affect cleavage and blastocyst rates, respectively, in PT control groups...
Tipo: Separatas Palavras-chave: Artificial activation; Bovine; Embryonic development; Pronuclear transfer.; Beef cattle..
Ano: 2009 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/576277
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Ooplast-mediated developmental rescue of bovine oocytes exposed to ethidium bromide. Repositório Alice
CHIARATTI, M. R.; FERREIRA, C. R.; PERECIN, F.; NICIURA, S. C. M.; SANGALLI, J. R.; MESQUITA, L. G.; BALIEIRO, J. C. de C.; SMITH, L. C.; GARCIA, J. M.; MEIRELLES, F. V..
Ooplasm transfer has been used successfully to treat infertility in women with ooplasmic insufficiency and has culminated in the birth of healthy babies. To investigate whether mitochondrial dysfunction is a factor in ooplasmic insufficiency, bovine oocytes were exposed to ethidium bromide, an inhibitor of mitochondrial DNA replication and transcription, during in-vitro maturation (IVM). Exposure of immature oocytes to ethidium bromide for 24?h during IVM hampered meiotic resumption and the migration of cortical granules. However, a briefer treatment with ethidium bromide during the last 4?h of IVM led to partial arrest of preimplantation development without affecting oocyte maturation. Ooplasm transfer was then performed to rescue the oocytes with...
Tipo: Artigo de periódico Palavras-chave: Embryo; Ethidium bromide; Oocyte; Transfer; Ooplasm; Mitochondrial DNA.
Ano: 2011 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/876985
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Perdas por volatilização de N-NH3 proveniente da mistura de uréia com zeolita natural aplicada no inverno na cultura da roseira. Repositório Alice
WERNECK, C. G.; BREDA, F.; SPERANDIO, D. B.; FERREIRA, C. R.; MONTE, M. B. M.; FERNANDES, P. R. T.; BARROS, F. S.; BERNARDI, A. C. de C.; MAZUR, N.; POLIDORO, J. C..
Com objetivo de avaliar a mistura de zeolita natural (arenito zeolítico) com uréia quanto às perdas de NH3 por volatilização, realizou-se experimento em área de produção comercial de flores de corte em Nova Friburgo, RJ. No verão de 2007 foi realizada adubação de cobertura na cultura da roseira (Rosa spp.) com duas doses de uréia (60 e 120 kg N. ha-1) misturadas ou não com arenito zeolítico, na proporção de 20% p/p. As perdas de NH3 por volatilização foram avaliadas por período de seis dias consecutivos após aplicação dos fertilizantes. Utilizou-se câmara semi-aberta livre estática, confeccionada com frasco plástico transparente de 2 litros (PET). A mistura é eficiente na redução das perdas de NH3 por volatilização, sendo a mesma, em média 24%. O arenito...
Tipo: Separatas Palavras-chave: Cultura da roseira..
Ano: 2008 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/48756
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Pronounced segregation of donor mitochondria introduced by bovine Ooplasmic tranfer to the female germ-line. Repositório Alice
FERREIRA, C. R.; BURGSTALLER, J. P.; PERECIN, F.; GARCIA, J. M.; CHIARATTI, M. R.; MÉO, S. C.; MULLER, M.; SMITH, L. C.; MEIRELLES, F. V.; STEINBORN, R..
Ooplasmic transfer (01) has been used in basic mouse research for studying lhe segregation of mtDNA, as well as in human assisted reproduction for improving embryo development in cases of persistent developmental failure. Using cattle as a large-animal model, we demonstrate that lhe moderate amount of mitochondria introduced by OT is transmitted to lhe offspring's oocytes; e.g., modifies lhe germ fine. The danar mtDNA was detectable in 25% and 65% of oocytes collected from two females. Its high variation in heteroplasmic oocytes, ranging from 1.1% to 33.5% and from 0.4% to 15.5%, can be explained by random genetic drift in lhe female germ line. Centrifugation-mediated enrichment of mitochondria il1 lhe pole zone of lhe recipient zygote's ooplasm and its...
Tipo: Artigo de periódico Palavras-chave: Bovine; Developmental biology; Embryo; Gamete biology; Ooplasmic; DNA.
Ano: 2010 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/856388
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The effects of ovalbumin as a protein source during the in vitro production of bovine embryos. Repositório Alice
TETZNER, T. A. D.; SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; NICIURA, S. C. M.; FERREIRA, C. R.; OLIVEIRA, C. S.; GARCIA, J. M..
Embryo quality is influenced by the culture conditions that affect in vitro maturation (IVM), fertilization (IVF) and culture (IVC) rates. The present study investigated the feasibility of producing bovine embryos after the replacement of fetal calf serum (FCS) and bovine serum albumin (BSA) by ovalbumin (OVA). The IVM and IVC medium were supplemented with 10% FCS, 4 mg/mL BSA, or 4 mg/mL OVA. The IVF medium was supplemented with 6 mg/mL BSA or OVA. For IVM, supplementation with FCS, BSA, and OVA did not affect nuclear maturation or cortical granule migration. Higher rates of formation of two pronuclei were obtained when FCS was employed for IVM (79.97%), regardless of the supplement used for IVF, and when BSA was used for IVF (59.4%), regardless of the...
Tipo: Separatas Palavras-chave: Bovine embryo; Protein source.; In vitro culture; Ovalbumin..
Ano: 2011 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/908631
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Troca de carioplastos entre zigotos ativados com estrôncio ou 6-DMAP. Repositório Alice
NICIURA, S. C. M.; FERREIRA, C. R.; PERECIN, F.; SARAIVA, N. Z.; TETZNER, T. A. D.; BORGES, J. C.; YAMAZAKI, W.; LEAL, C. L. V.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M..
A ativação oocitária constitui importante etapa dos procedimentos de transferência nuclear e injeção espermática intracitoplasmática. Dessa maneira, toma-se necessária a busca por tratamentos de ativação eficientes e que promovam o efeito mais semelhante possivel ao desencadeado pelo espermatozóide. Neste trabalho, avaliamos o efeito da troca de carioplasto entre zigotos produzidos por dois tratamentos de ativação diferentes sobre o desenvolvimento embrionário inicial. Para tanto, oócitos bovinos foram maturados in vitro por 24h em TCM 199 com 10% de SFB, 1 ug/mL de FSH, 50ug/mL de hCG e 1 ug/ mL de estradiol, desnudados com hialuronidase (0,5% por 5min) e ativados com ionomicina (5~M por 5min) seguida de estrôncio (20mM SrCI2 e 1 O~g/mL de citocalasina D,...
Tipo: Separatas Palavras-chave: Transferência nuclear; Ativação oocitária.
Ano: 2007 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/48359
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Volatilização de n-nh3 do solo após adição da mistura de uréia com zeolita natural aplicada na cultura da roseira. Repositório Alice
SOUZA JÚNIOR, H. C. M.; WERNECK, C. G.; BREDA, F.; FERREIRA, C. R.; MONTE, M. B. M.; FERNANDES, P. R. T.; BARROS, F. S.; ZUMPICHIATTI, A. A.; BERNARDI, A. C. de C.; MAZUR, N.; BALIEIRO, F. C.; POLIDORO, J. C..
Com objetivo de avaliar a mistura (física) de arenito zeolítico com uréia quanto às perdas de NH3 por volatilização, realizou-se experimento em área de produção comercial de flores de corte em Nova Friburgo, RJ. No outono de 2007 foi realizada adubação de cobertura na cultura da roseira (Rosa spp.) com duas doses de uréia (60 e 120 kg N. ha-1 ) misturadas ou não com arenito zeolítico, na proporção de 20% p/p. As perdas de NH3 por volatilização foram avaliadas por período de seis dias consecutivos após aplicação dos tratamentos. Utilizou-se câmara semi-aberta livre estática, confeccionada com frasco plástico transparente de 2 litros (PET). A mistura reduziu, em média 35% das perdas de NH3 por volatilização, demonstrando que o arenito zeolítico (CETEM)...
Tipo: Separatas Palavras-chave: Zeolita; Roseira.; Fertilizante; Uréia..
Ano: 2008 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/48658
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