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Comparative study of Mycobacterium bovis primary isolation methods BJM
Issa,Marina de Azevedo; Soares Filho,Paulo Martins; Fonseca Júnior,Antônio Augusto; Hodon,Mikael Arrais; Santos,Lílian Cristian dos; Reis,Jenner Karlisson Pimenta dos; Cerqueira Leite,Rômulo.
Abstract For the definitive diagnosis of bovine tuberculosis, isolation of the etiologic agent is required. However, there is no consensus on the best methodology for isolation of Mycobacterium bovis in Brazil. This study evaluated the most used decontaminants and culture media in the country, in order to identify the best combination for the Brazilian samples. Three decontaminants - 2% sodium hydroxide (w/v), 0.75% hexadecylpiridinium chloride (w/v) and 5% sulphuric acid (v/v) and four culture media - 7H11 Middlebrook with additives and OADC supplement “A” (7H11 A), the same media with another supplement trademark (7H11 B), tuberculosis blood agar (B83) and Stonebrink's medium were compared. Regarding the isolation, there were no significant differences...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Mycobacterium bovis; Diagnosis; Middlebrook 7H11; Isolation; Sulphuric acid.
Ano: 2017 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1517-83822017000100139
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Comparison of nine DNA extraction methods for the diagnosis of bovine tuberculosis by real time PCR Ciência Rural
Moura,André; Hodon,Mikael Arrais; Soares Filho,Paulo Martins; Issa,Marina de Azevedo; Oliveira,Ana Paula Ferreira de; Fonseca Júnior,Antônio Augusto.
ABSTRACT: Bovine tuberculosis is an infectious disease with a high impact on the cattle industry, particularly in developing countries. PCR is a very sensitive method for detection of infectious agents, but the sensitivity of molecular diagnosis is largely dependent on the efficiency of the DNA extraction methods. The objective of this study was to evaluate DNA extraction methods for direct detection of Mycobacterium bovis in bovine tissue. Nine commercial kits for DNA extraction were evaluated when combined with two real time PCRs. The DNeasy Blood & Tissue Kit from QIAGEN showed better performance and sensitivity followed by the DNA Mini Kit RBC and FTA Elute Micro Card. Results suggested that, even when the analytical sensitivity of the qPCR is...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Bovine tuberculosis; DNA extraction; Real time PCR.
Ano: 2016 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782016000701223
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Concentrações de imunoglobulinas G em colostro de vacas mestiças holandês-zebu Ciência Rural
Soares Filho,Paulo Martins; Belém,Pacífico Antônio Diniz; Ribeiro Júnior,José Ivo; Salcedo,Joaquin Hernan Patarroyo.
Oitenta e oito vacas leiteiras mestiças holandês-zebu (HZ) foram distribuídas de acordo com a percentagem de grau de sangue holandês em quatro grupos: Grupo 1 = animais com menos de 70% de grau de sangue holandês (19 vacas); Grupo 2 = animais com 75% de grau de sangue holandês, que equivale a ¾ HZ (46 vacas); Grupo 3 = mestiços entre 80 e 90% de grau de sangue holandês, que corresponderam a 13/16 HZ e 7/8 HZ (11 vacas); Grupo 4 = vacas com mais de 90% de grau de sangue holandês (12 vacas). Após o parto, amostras de colostro da primeira ordenha foram colhidas e, posteriormente, submetidas à imunodifusão radial simples para determinações dos níveis de imunoglobulinas G (IgG). Os resultados obtidos permitiram concluir que as concentrações de IgG não são...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Bovinos; Colostro; Imunoglobulina; Transferência de imunidade passiva; Imunidade neonatal.
Ano: 2001 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782001000600019
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Validação interlaboratorial do teste de polarização fluorescente para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina Ciência Rural
Mathias,Luis Antonio; Corbellini,Luis Gustavo; Maia,Lúcia; Nascimento,Kelly Fagundes; Paulin,Lília Márcia Silva; Samartino,Luis Ernesto; Serqueira,Marco Antonio; Soares Filho,Paulo Martins; Souza,Marcília Maria Alves de.
Esta investigação teve por objetivo validar o teste de polarização fluorescente (TPF) para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina, determinando a sensibilidade (SE) e a especificidade relativas (SP) e verificando a reprodutibilidade do teste em quatro laboratórios no Brasil. Foram selecionadas 1.389 amostras de soro sanguíneo, as quais foram inicialmente submetidas aos testes do antígeno acidificado tamponado (AAT) e mercaptoetanol (2-ME). As mesmas amostras foram submetidas à reação de fixação de complemento (RFC) e ao TPF. Para a avaliação do TPF, foi adotada a combinação dos resultados do AAT, da RFC e do 2-ME, utilizados como população de referência (padrão-ouro). Para a determinação do ponto de corte do TPF que proporciona a melhor combinação de...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Brucelose bovina; Diagnóstico sorológico; Teste de polarização fluorescente.
Ano: 2010 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782010001000013
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Validation of a real-time PCR assay for the molecular identification of Mycobacterium tuberculosis BJM
Sales,Mariana L.; Fonseca Júnior,Antônio Augusto; Orzil,Lívia; Alencar,Andrea Padilha; Silva,Marcio Roberto; Issa,Marina Azevedo; Soares Filho,Paulo Martins; Lage,Andrey Pereira; Heinemann,Marcos Bryan.
Mycobacterium tuberculosis is the major cause of tuberculosis in humans. This bacillus gained prominence with the occurrence of HIV, presenting itself as an important opportunistic infection associated with acquired immunodeficiency syndrome (AIDS). The current study aimed to develop a real-time PCR using Eva Green technology for molecular identification of M. tuberculosis isolates. The primers were designed to Rv1510 gene. Ninety nine samples of M. tuberculosis and sixty samples of M. bovis were tested and no sample of the bovine bacillus was detected by the qPCR. Statistical tests showed no difference between the qPCR and biochemical tests used to identify the Mycobacterium tuberculosis. The correlation between tests was perfect with Kappa index of 1.0...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Mycobacterium tuberculosis; Diagnosis; Real time PCR.
Ano: 2014 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1517-83822014000400029
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Validation of the multiplex PCR for identification of Brucella spp. Ciência Rural
Orzil,Lívia de Lima; Preis,Ingred Sales; Almeida,Iassudara Garcia de; Souza,Patrícia Gomes de; Soares Filho,Paulo Martins; Jacinto,Fabrício Barcelos; Fonseca Júnior,Antônio Augusto.
ABSTRACT: A multiplex PCR technique for detection of Brucella spp. in samples of bacterial suspension was validated as a complementary tool in the diagnosis of the disease. This technique allows the characterization of the agent without performing biochemical tests, which greatly reduces the time for a final diagnosis, and provides more security for the analyst by reducing the time of exposure to microorganisms. The validation was performed in accordance with the Manual of Diagnostic Tests from OIE (2008) and following the requirements present in the ABNT NBR ISO/IEC 17025:2005. The mPCR validated in this study identified the different species of Brucella ( Brucella abortus , B. suis , B. ovis e B. melitensis ) of bacterial suspension obtained from the...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Brucellosis; Molecular identification; Zoonosis; Brucella; Multiplex PCR.
Ano: 2016 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782016000500847
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