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Expressão em Escherichia coli da proteína capsidial do Watermelon mosaic virus e produção de anti-soro Trop. Plant Pathol.
Barbieri,Manuela R.; Carvalho,Murilo G. de; Zambolim,Eunize M.; Zerbini,F. Murilo.
Um anti-soro policlonal específico para Watermelon mosaic virus (WMV) foi produzido por meio da imunização de coelhos com proteína capsidial purificada, expressa in vitro em células de Escherichia coli. O gene cp foi amplificado via RT-PCR utilizando oligonucleotídeos específicos, a partir de RNA viral extraído de preparações virais concentradas. O fragmento amplificado foi clonado em pBLUESCRIPT KS+ e completamente seqüenciado para confirmação de sua identidade e integridade. Em seguida, o fragmento foi subclonado no vetor de expressão pRSET-A. Plasmídeos recombinantes foram utilizados para a expressão da proteína capsidial em E. coli BL21::DE3. A proteína foi purificada por meio de cromatografia de afinidade em coluna de Ni+-NTA, a partir de proteínas...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Cucurbitáceas; ELISA; Imunodifusão; Western blot.
Ano: 2004 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-41582004000200017
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