| Registro completo |
| Provedor de dados: |
Thai Agricultural
|
| País: |
Thailand
|
| Título: |
การผลิตโพลีโคลนอลแอนติซีรัมที่จำเพาะต่อ Streptomyces-PR15 และการใช้ตรวจติดตามเชื้อรอบผิวรากต้นกล้าพริก
Production of polyclonal antiserum specific to Streptomyces-PR15 and detection of target bacteria in rhizoplane of chilli seedlings
|
| Autores: |
Weerakorn Saengsai
Petcharat Thummabenjapone
|
| Data: |
2015-06-09
|
| Ano: |
2013
|
| Palavras-chave: |
Pepper
Chilli seedlings
Antagonist
Streptomyces-PR15
Polyclonal antiserum
Bioproduct
Elisa
Antiserum against
พริกหนุ่มเขียว
พริกขี้หนู
รากต้นกล้า
จุลินทรีย์ปฏิปักษ์
เชื้อแบคทีเรีย สเตรปโตมัยซีส
โพลีโคลนอลแอนติบอดี
การตรวจติดตามเชื้อ
ชีวภัณฑ์
คุณภาพแอนติซีรัม
แอนติบอดีจำเพาะ
|
| Resumo: |
The antagonistic Streptomyces-PR15 is a broad spectrum against various plant pathogenic fungi and bacteria of economic crops. To develop the ELISA technique for detection the Streptomyces-PR15 in bioproducts and plant surrounding environment, the production of polyclonal antiserum against Streptomyces-PR15 was carried out. The antigen prepared from Streptomyces-PR15 whole cell proteins was mixed with Freund’s incomplete adjuvant (1:1, v/v) was injected to in New Zealand White rabbit with immunization program as follows, intramuscular injection for 3 times then only antigen was intravenous injected for 2 times. Bleeding was done at 10 days after final immunization and then at weekly interval for 8 weeks. The antigen was re-intravenous injected at 14 days after 7th bleeding.Bleeding was done after 10 days and addition by weekly for 2 weeks. Titer of STPR15 As was increased to 1:200,000 at week 7th and week 10th. The sensitivity of STPR15 As for detection whole cell proteins was 0.312 ug/ml. The STPR15 As was moderately serological related to 3 isolates of antagonistic Streptomyces spp. (PR87, PR84 and PR78) but not reacted with various isolates of Bacillus spp., bacteria from leaves surface, bacteria from soil, manure and compost and plant pathogenic bacteria. The STPR15 As could be used for reliable detection Streptomyces-PR15 in rhizoplane of chilli seedling at 104cfu/ml.
เชื้อแบคทีเรีย สเตรปโตมัยซีส-PR15 (Streptomyces -PR15) เป็นแบคทีเรียปฏิปักษ์ที่มีฤทธิ์กว้าง ใช้ควบคุมทั้งเชื้อรา และแบคทีเรียสาเหตุโรคที่สำคัญของพืชเศรษฐกิจ เพื่อพัฒนาเทคนิค ELISA สำหรับใช้ตรวจติดตามเชื้อ Streptomyces -PR15 ในชีวภัณฑ์ และในสภาพแวดล้อมรอบต้นพืช จึงได้ผลิตแอนติบอดีที่จำเพาะกับเชื้อ Streptomyces-PR15 โดยการฉีดแอนติเจนที่เตรียมจากเซลล์เชื้อ Streptomyces -PR15 ที่ทำให้เซลล์แตกด้วย ultrasonicator นำไปผสมกับ Freund’s incomplete adjuvant ในอัตราส่วน1:1 (ปริมาตรต่อปริมาตร) ฉีดเข้าที่กล้ามเนื้อขาหลังของกระต่ายสีขาวพันธุ์นิวซีแลนด์ ไวท์ จำนวน 3 ครั้ง จากนั้นฉีดเฉพาะแอนติเจนเข้าเส้นเลือดกลางใบหู 2 ครั้ง เก็บเลือด จำนวน 8 ครั้ง หลังจากเก็บเลือดครั้งที่ 8 แล้วจึงฉีดกระตุ้นซ้ำด้วยแอนติเจน เข้าบริเวณเส้นเลือดกลางใบหู 1 ครั้ง หลังจากนั้น 10 วัน จึงเก็บเลือด 2 ครั้ง พบว่าแอนติซีรัมที่ผลิตได้ มีค่า titer สูงสุดเป็น 1:200,000 ในสัปดาห์ที่ 7 และ 10 มีความไวในการตรวจหาโปรตีนจากเซลล์เชื้อ Streptomyces -PR15 ที่ระดับ 0.312 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร ไม่เกิดปฏิกิริยาข้ามกับเชื้อปฏิปักษ์ Streptomyces-PR13, Streptomyces-PR22,Streptomyces-PR33, Bacillus spp., แบคทีเรียจากผิวใบพืช เแบคทีเรียแยกจากดิน ปุ๋ยคอก และปุ๋ยหมัก เชื้อแบคทีเรียสาเหตุโรคพืช แต่มีความสัมพันธ์ทางเซรุ่มวิทยาปานกลางกับเชื้อ Streptomyces ปฏิปักษ์ 3 ไอโซเลต (PR87, PR84 และ PR78) เมื่อนำไปตรวจหาเชื้อ Streptomyces-PR15 บริเวณผิวรากของต้นกล้าพริก พบว่าสามารถตรวจพบเชื้อ Streptomyces-PR15 ได้ที่ระดับ 104 cfu/ml
|
| Tipo: |
PhysicalObject
|
| Idioma: |
Thailandês
|
| Identificador: |
ISSN 0125-0485
http://anchan.lib.ku.ac.th/agnet/handle/001/5804
Khon Kaen Agriculture Journal (Thailand), ISSN 0125-0485, 2013, V. 41, Suppl. 1, p. 220-225
แก่นเกษตร, ISSN 0125-0485, 2556, ปีที่ 41, ฉบับพิเศษ 1, หน้า 220-225
|
| Direitos: |
ลิขสิทธิ์เป็นของเจ้าของบทความแต่เพียงผู้เดียว
สงวนลิขสิทธิ์ตามพระราชบัญญัติลิขสิทธิ์ พ.ศ. 2537
เอกสารนี้สงวนไว้สำหรับการใช้งานเพื่อการศึกษาเท่านั้น ไม่อนุญาตให้นำไปใช้ประโยชน์ด้านการค้า ไม่ว่ากรณีใดๆ ทั้งสิ้น อีกทั้งห้ามมิให้ดัดแปลงเนื้อหา และต้องอ้างอิงถึงเจ้าของเอกสารทุกครั้งที่มีการนำไปใช้
|
|
