| Resumo: |
El hongo Conidiobolus coronatus es un saprófito facultativo, patógeno de muchas especies de insectos e incluso está reportado como causante de micosis subcutánea en humanos, aunque los reportes de esto último son poco comunes y se restringen a regiones con climas tropicales y de alta humedad. En la presente investigación se analiza la variación genética de aislamientos de C. coronatus de diferentes hospedantes (incluyendo al humano) y se corrobora la presencia de una bacteria endosimbiótica en dicho hongo. Mediante las técnicas RAPD, SSR y secuenciación de ITS 1 y 2 y región 5.8, se obtuvo variación intraespecífica y una clara distancia genética entre aislamientos obtenidos de humanos y otras fuentes (insectos y suelo). Para corroborar la endosimbiosis, se realizaron clonaciones a partir del metagenoma de C. coronatus seguido de un análisis molecular del gen 16S rARN y un análisis morfológico al micelio y esporas con microscopía láser confocal mediante fluorescencia para distinguir la presencia de la bacteria en los diferentes aislamientos de C. coronatus. Los resultados muestran que existe una endosimbiosis entre el hongo C. coronatus y una bacteria que pertenece al género Pseudomonas. Este trabajo es el primer reporte sobre diversidad genética entre aislamientos de C. coronatus provenientes de diferentes hospedantes (insecto, suelo y lesiones humanas) y zonas geográficas, a la vez que es también el primer reporte de una endosimbiosis en la que está involucrado un hongo entomoftoral y una bacteria del género Pseudomonas. _______________ ABSTRACT : The fungi Conidiobolus coronatus is a facultative saprophytic, pathogen for many insect species, and it is even reported as causing of subcutaneous mycosis in human, although the occurrence of this is rather seldom and restricted to tropical climate and high humidity regions. After analyzing the genetic variation of C. coronatus isolates taken from different hosts (human included), the existence of an endosymbiotic bacterium within such fungi has been corroborated. Through the RAPD, SSR and ITS 1, 2 and 5.8 region sequenciation techniques, intraespecific variation and a clear genetic distance between isolates taken from human and other sources (insects and soil) has been determined. In order to corroborate the endosymbiosis, clonings from C. coronatus metagenome were carried out, followed by 16S rARN gen molecular analysis and a morphologic analysis of mycelium and spores of C. Coronatus with confocal laser microscopy through fluorescence. Results show an endosymbiosis between the fungi C. coronatus and a bacterium, belonging to Pseudomonas genus, does exist. This research is the first report about genetic diversity between C. coronatus isolates taken from different hosts (insects, soil and human wounds) and geographic zones. At the same time, this is also the very first report of an endosymbiosis in which an entomophtoral fungi and a bacterium from genus Pseudomonas are involved.
Tesis. (Doctorado en Ciencias, Especialista en Entomología y Acarología).- Colegio de Postgraduados, 2010.
Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACYT). Consejo Mexiquense de Ciencia y Tecnología (COMECyT)
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