| Registro completo |
| Provedor de dados: |
Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci.
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| País: |
Brazil
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| Título: |
Sexagem de embriões bovinos fecundados in vitro pela técnica de PCR multiplex
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| Autores: |
LUZ,Marcelo Rezende
WATANABE,Yeda Fumie
FERRO,Jesus Aparecido
FERRO,Maria Inês T.
MAURO,Sônia Marli Singaretti de
HOSSEPIAN DE LIMA,Vera Fernanda Martins
FRANCESCHINI,Paulo Henrique
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| Data: |
2000-12-01
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| Ano: |
2000
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| Palavras-chave: |
Sexagem
Embrião
Bovino
PCR
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| Resumo: |
Neste trabalho, a técnica de PCR ("polymerase chain reaction") foi utilizada para a sexagem de 92 embriões bovinos fertilizados in vitro. Os embriões originaram-se de fertilização in vitro de oócitos aspirados de ovários de fêmeas bovinas, provenientes de abatedouros comerciais. Os oócitos foram maturados, fertilizados e cultivados até o estádio de blastocisto. Os embriões foram lavados em solução de PBS, transferidos para tubos de polipropileno contendo água ultrapura, e imediatamente congelados a -196ºC. Os embriões foram descongelados sobre isopor contendo gelo picado e tratados com proteinase K. Para a reação de PCR, utilizaram-se alíquotas de 34 µl de cada tudo, onde foram acrescidos dois pares de primers, seqüência BC1.2 e seqüência satélite 1.715, desoxinucleotídeos, MgCl2, tampão PCR 10X, TaqDNA polimerase e água, em um volume final de 50 µl. As amostras foram amplificadas e a eletroforese realizada em gel de poliacrilamida a 8%. Os géis foram corados com solução de brometo de etídio e analisados em transiluminador de luz ultravioleta. Um índice de 93,47% de amplificação foi atingido, com 41 embriões (47,67%) machos e 45 (52,32%) embriões fêmeas. O uso de gel de poliacrilamida a 8% foi eficaz na separação de fragmentos de DNA muito próximos.
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| Tipo: |
Info:eu-repo/semantics/article
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| Idioma: |
Português
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| Identificador: |
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1413-95962000000600006
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| Editor: |
Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia / Universidade de São Paulo
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| Relação: |
10.1590/S1413-95962000000600006
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| Formato: |
text/html
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| Fonte: |
Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science v.37 n.6 2000
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| Direitos: |
info:eu-repo/semantics/openAccess
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