| Registro completo |
| Provedor de dados: |
Ciência Rural
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| País: |
Brazil
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| Título: |
Produção de antissoro policlonal utilizando a proteína capsidial recombinante do Rupestris stem pitting-associated virus
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| Autores: |
Basso,Marcos Fernando
Fajardo,Thor Vinícius Martins
Eiras,Marcelo
Ayub,Ricardo Antônio
Nickel,Osmar
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| Data: |
2010-11-01
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| Ano: |
2010
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| Palavras-chave: |
Videira
RSPaV
Detecção
Sorologia
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| Resumo: |
O Rupestris stem pitting-associated virus (RSPaV) é o agente causal das caneluras do lenho da videira. Este trabalho teve como objetivo produzir antissoro policlonal a partir da proteína capsidial (CP) recombinante do RSPaV e avaliar a sua especificidade e sensibilidade. O gene da CP do RSPaV, com 780pb, foi previamente caracterizado. Esse gene foi subclonado no sítio de restrição EcoRI, no vetor de expressão pRSET-B e o plasmídeo recombinante foi utilizado para induzir a expressão da CP em Escherichia coli. A CP, ligada a uma cauda de seis histidinas, foi purificada por meio de cromatografia de afinidade em coluna de Ni-NTA a partir do extrato de proteínas totais extraídas de E. coli. A identidade da proteína purificada foi confirmada em SDS-PAGE e Western blot, utilizando-se anticorpos comerciais contra a cauda de seis histidinas. A CP recombinante expressada in vitro apresentou massa molecular de cerca de 31kDa. A proteína purificada foi quantificada e 2,55mg foram utilizados para a imunização de um coelho. O antissoro policlonal obtido reagiu com diferentes isolados deste vírus, extraídos de videiras em ELISA indireto.
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| Tipo: |
Info:eu-repo/semantics/article
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| Idioma: |
Português
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| Identificador: |
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782010001100022
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| Editor: |
Universidade Federal de Santa Maria
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| Relação: |
10.1590/S0103-84782010001100022
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| Formato: |
text/html
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| Fonte: |
Ciência Rural v.40 n.11 2010
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| Direitos: |
info:eu-repo/semantics/openAccess
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