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Production of leptospiral LipL32 antigen in Pichia pastoris and its use in an enzyme-linked immunosorbent assay BABT
Monte,Leonardo Garcia; Leal,Fernanda Munhoz Dos Anjos; Hartwig,Daiane Drawanz; Vasconcellos,Sílvio Arruda; Brihuega,Bibiana; Dellagostin,Odir Antonio; Hartleben,Cláudia Pinho.
The production of recombinant LipL32 protein using Escherichia coli has been used extensively for the development of vaccines and diagnostic tests for leptospirosis. However, E. coli has demonstrated limitations, including low yield and lack of post-translational modifications. In this study, rLipL32 was produced in eukaryotic expression system (Pichia pastoris) and evaluated the antigen by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The yield obtained from the culture supernatant reached 270 mg/L and ELISA showed an accuracy of 95.34%. In summary, the production of rLipL32 using P. pastoris did not impair the antigenic characteristics of this antigen and ensured its use for detecting the leptospiral antibodies in swine sera.
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Pichia pastoris; LipL32; ELISA; Leptospirosis.
Ano: 2014 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1516-89132014000300007
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Influência da via de inoculação sobre o estabelecimento e a evolução da leptospirose em hamsters (Mesocricetus auratus) experimentalmente infectados com Leptospira interrogans sorovar pomona Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci.
Macedo,Nicodemos Alves de; Morais,Zenáide Maria de; Camargo,Cláudio Roberto de Almeida; Alves,Clebert José; Azevedo,Sérgio Santos de; Nümberger Júnior,Rodolfo; Vasconcellos,Sílvio Arruda.
Foi investigada a influência da via de inoculação sobre o estabelecimento e a evolução da leptospirose em hamsters (Mesocricetus auratus) experimentalmente infectados com Leptospira interrogans sorovar pomona. As vias de inoculação ensaiadas foram: intraperitoneal, subcutânea, oral, conjuntival e escarificação cutânea. O inóculo infeccioso foi constituído por uma cultura em meio de Fletcher, com 20 a 30 leptospiras por campo microscópio no aumento de 200 vezes. Os animais controle foram inoculados apenas com meio de Fletcher. Foram colhidas amostras de soro sanguíneo e fragmentos de rins na fase agônica da doença ou no 21º dia pós-infecção, quando todos os animais foram sacrificados. Para a pesquisa de leptospiras, foi feito o exame direto com microscopia...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Via de inoculação; Hamsters; Sorovar pomona.
Ano: 2004 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1413-95962004000300008
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Avaliação da virulência em hamsters (Mesocricetus auratus) de estirpes de Mycobacterium avium presentes na população de suínos do sul do Brasil Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci.
Oliveira,Eugenia Márcia de Deus; Morais,Zenaide Maria; Tabata,Rosana; Dias,Ricardo Augusto; Oliveira,Rosângela Siqueira de; Leão,Sylvia Cardoso; Morés,Nelson; Guerra,José Luiz; Vasconcellos,Sílvio Arruda; Ferreira,Fernando; Pinheiro,Sonia Regina; Balian,Simone Carvalho; Ferreira Neto,José Soares.
Tendo sido comprovada a existência de quatro famílias molecularmente distintas de M. avium (PIG-A, B, C e D) circulando em suínos da região sul do Brasil, e havendo dúvidas a respeito da importância da transmissão horizontal como mecanismo de manutenção da doença, o presente teve por objetivo estudar a virulência dessas estirpes, informação importante para o aperfeiçoamento dos métodos de controle. Uma estirpe representante de cada família foi inoculada pela via intra-peritoneal em 48 hamsters com uma dose de 30.000 U.F.C. por animal. Após 2, 13, 26 e 40 dias da inoculação (T1 a T4), 12 hamsters inoculados de cada família foram anestesiados, sacrificados e os agentes foram quantificados no fígado, baço e pulmão. Os resultados foram expressos em número de...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Mycobacterium avium; Virulência; Suínos; Micobacteriose; Tuberculose.
Ano: 2002 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1413-95962002000400007
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Comparação de três testes sorológicos aplicados ao diagnóstico da infecção de caninos por Brucella canis Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci.
Azevedo,Sérgio Santos de; Vasconcellos,Sílvio Arruda; Keid,Lara Borges; Grasso,Lília Márcia Paulin da Silva; Pinheiro,Sônia Regina; Mascolli,Roberta; Alves,Clebert José.
Foram comparados os testes de imunodifusão em gel de ágar (IDGA), imunodifusão em gel de ágar em soros tratados pelo 2-mercaptoetanol (IDGA-ME) e reação de fixação de complemento (CFT), aplicados ao diagnóstico da infecção de caninos por Brucella canis. O antígeno utilizado nas técnicas de IDGA e IDGA-ME constituiu-se de lipopolissacarídeos e proteínas de Brucella ovis, amostra Reo 198, e na CFT, o antígeno empregado foi a Brucella ovis, amostra 63/290. Foram examinadas 80 amostras de soro sanguíneo de cães colhidas durante a campanha de vacinação anti-rábica animal do Município de Santana de Parnaíba-SP, realizada em agosto de 1999. As provas sorológicas foram comparadas, duas a duas, pelo teste de Mc Nemar, e a concordância foi analisada pelo indicador...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Sorologia; Diagnóstico; Brucelose canina; Brucella canis.
Ano: 2004 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1413-95962004000200005
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Soroprevalência de leptospirose em cães errantes da cidade de Patos, Estado da Paraíba, Brasil Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci.
Batista,Carolina de Sousa Américo; Azevedo,Sérgio Santos de; Alves,Clebert José; Vasconcellos,Sílvio Arruda; Morais,Zenaide Maria de; Clementino,Inácio José; Lima,Fabiano de Silva; Araújo Neto,José Othon de.
O presente trabalho teve como objetivo investigar a prevalência de leptospirose em cães errantes da cidade de Patos, Estado da Paraíba, Brasil. O experimento foi conduzido durante o período de fevereiro a abril de 2003, com a colheita de 130 amostras de soro canino. O diagnóstico da leptospirose foi determinado pela técnica de soroaglutinação microscópica, utilizando-se uma coleção de 22 variantes sorológicas. Para a caracterização dos sorovares mais prováveis, levou-se em conta a titulação e a freqüência. A prevalência encontrada foi de 20%, com maior frequência dos sorovares autumnalis (20%), pomona (17,5%), grippotyphosa (10%) e patoc (10%).
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Prevalência; Leptospirose; Cães errantes; Soroaglutinação microscópica.
Ano: 2004 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1413-95962004000200009
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Efficacy of leptospiral commercial vaccines on the protection against an autochtonous strain recovered in Brazil BJM
Sonada,Rafael Bazaglia; Azevedo,Sérgio Santos de; Soto,Francisco Rafael Martins; Costa,Diego Figueiredo da; Morais,Zenaide Maria de; Souza,Gisele Oliveira de; Gonçales,Amane Paldês; Miraglia,Fabiana; Vasconcellos,Sílvio Arruda.
Abstract In swine and bovines, leptospirosis prevention and control is carried out via vaccination of susceptible animals using bacterins. However, the efficiency of leptospirosis vaccines has been questioned. This work aimed to investigate the potency of five leptospirosis vaccines sold commercially in Brazil, challenging the animals with one autochthonous strain of Leptospira, Canicola serovar, denoted LO4, isolated from swine. The standard protocol was followed, and renal carriers of Leptospira were identified among the surviving animals by culture and PCR. Of the five vaccines tested, only two proved effective. None of the surviving animals was positive by culture; however, one animal was positive by PCR. Three of the five vaccines sold commercially in...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Leptospirosis; Vaccination; Production animals; Control.
Ano: 2018 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1517-83822018000200347
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Detection of Brucella ovis in ovine from Paraíba State, in the Northeast region of Brazil BJM
Alves,Clebert José; Figueiredo,Salomão Moreira de; Azevedo,Sérgio Santos de; Clementino,Inácio José; Keid,Lara Borges; Vasconcellos,Sílvio Arruda; Batista,Carolina de Sousa Américo; Rocha,Vivianne Cambuí Mesquita; Higino,Severino Silvano.
To determine the presence of Brucella ovis in ovine from Paraíba State, in the Northeast region of Brazil, 80 animals slaughtered in the public slaughterhouse of Patos city were used. Before slaughter, blood samples were collected by jugular venopuncture from each animal, and after slaughter, testicles, epidydimus and uterus were aseptically collected. For the serological diagnosis of B. ovis and B. abortus infections, the agar gel immunodiffusion (AGID) and Rose Bengal (RBT) tests were carried out, respectively. In addition, microbiological culture and polymerase chain reaction (PCR) were performed on testicle, epidydimus and uterus samples. Six animals (7.5%) tested positive for the presence of B. ovis antibodies and all animals tested negative for the...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Brucella ovis; Isolation; PCR; Ovine; Paraíba State.
Ano: 2010 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1517-83822010000200016
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Detection of leptospires in clinically healthy piglets born from sows experimentally infected with Leptospira interrogans serovar Canicola BJM
Soto,Francisco Rafael M.; Azevedo,Sérgio Santos de; Morais,Zenaide Maria de; Pinheiro,Sônia Regina; Delbem,Ádina Cléia B.; Moreno,Andréa Micke; Paixão,Renata; Vuaden,Erlete R.; Vasconcellos,Sílvio Arruda.
Leptospirosis is an important zoonosis that causes reproductive disorders in swine. The isolation of leptospires from aborted fetuses, stillbirths and weak piglets was obtained in several occasions, however, the bacteria was never isolated from apparently healthy piglets born from apparently healthy infected dams. Six sows of the Landrace breed with a known date of service and pregnancy confirmed by ultrasonography were infected intravenously with 5ml of Leptospira interrogans serovar Canicola inoculum between 76 and 90 days of gestation, and one week after farrowing, at least one piglet per sow was euthanized and samples of liver, kidneys, lungs, heart, spleen and gastric content were taken and examined by PCR. Reproductive disorders or any clinical sign...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Experimental swine leptospirosis; Leptospira spp.; Serovar Canicola; Vertical transmission.
Ano: 2006 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1517-83822006000400034
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Anticorpos anti Brucella abortus, anti Brucella canis e anti Leptospira spp. em raposas (Pseudalopex vetulus) do semiárido paraibano, Nordeste do Brasil Ciência Rural
Azevedo,Sérgio Santos de; Silva,Maria Luana Cristiny Rodrigues; Batista,Carolina de Sousa Américo; Gomes,Albério Antônio de Barros; Vasconcellos,Sílvio Arruda; Alves,Clebert José.
O objetivo do presente trabalho foi determinar a ocorrência de anticorpos anti Brucella abortus, anti Brucella canis e anti Leptospira spp. em raposas (Pseudalopex vetulus). Para tanto, foram utilizadas 60 raposas atropeladas em rodovias no semiárido da Paraíba, Nordeste do Brasil. Para a detecção de anticorpos anti Brucella abortus, o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT) foi empregado como teste de triagem, e a prova do 2-mercaptoetanol foi empregada como método confirmatório. Para o diagnóstico sorológico das infecções por Brucella canis e Leptospira spp., foram utilizados os testes de imunodifusão em gel de agar (IDGA) e soroaglutinação microscópica, respectivamente. Todas as amostras foram negativas na pesquisa de anticorpos anti Brucella...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Sorologia; Brucelose; Leptospirose; Canídeos silvestres.
Ano: 2010 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782010000100031
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