| Resumen La detección de viroides mediante RT-PCR en México es de uso común en los laboratorios de acreditación para determinar la calidad sanitaria de plantas de cítricos, cuando se van a utilizar árboles madre para propagar plantas de vivero. En el presente trabajo se describe una metodología simple para la detección múltiple de los viroides Citrus exocortis viroid (CEVd), CVd II, y Citrus viroid III (CVd III) en una sola reacción de RT-PCR. La extracción de ácidos nucleicos se efectuó con cantidades mínimas (250 mg) de tejido, y adicionando 1% polivinilpirrolidona en la solución salina de extracción de glicina-fosfato. La detección de los tres viroides fue exitosa cuando las reacciones de RT se efectuaron con 2.0 μg de ARN, 1.0-1.5 mM de dNTP’s, 0.90 μM,... |
