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Purification and binding analysis of the nitrogen fixation regulatory NifA protein from Azospirillum brasilense BJMBR
Passaglia,L.M.P.; Van Soom,C.; Schrank,A.; Schrank,I.S..
NifA protein activates transcription of nitrogen fixation operons by the alternative sigma54 holoenzyme form of RNA polymerase. This protein binds to a well-defined upstream activator sequence (UAS) located at the -200/-100 position of nif promoters with the consensus motif TGT-N10-ACA. NifA of Azospirillum brasilense was purified in the form of a glutathione-S-transferase (GST)-NifA fusion protein and proteolytic release of GST yielded inactive and partially soluble NifA. However, the purified NifA was able to induce the production of specific anti-A. brasilense NifA-antiserum that recognized NifA from A. brasilense but not from K. pneumoniae. Both GST-NifA and NifA expressed from the E. coli tac promoter are able to activate transcription from the nifHDK...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: NifA protein; NifA antibodies; Azospirillum brasilense; Gel shift assay; NifA activity; Upstream activator sequence.
Ano: 1998 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-879X1998001100001
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