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Análise da expressao gênica do VEGF (vascular Endothelial growth factor) em placentas bovinas de animais clonados, produzidos in vitro e in vivo, Pelo método de rt-pcr semiquantitativo Repositório Alice
LANDIM, JR, L. P.; FERREIRA, C. R.; PERECIN, F.; NICIURA, S. C. M.; YAMAZAKI, W.; MIGLINO, M. A.; GARCIA, J. M..
O sucesso da produção de embriões por fecundação in vitro ou transferência nuclear depende de uma variedade de fatores, dos quais a formação de uma incompleta vascularização placentária representa uma das principais causas de perda gestacional precoce. Neste trabalho, avaliou-se a expressão relativa de Fator de Crescimento Endotélio-vascular (VEGF), um potente agente vasculogênico, em placentas de bovinos clonados por transferência nuclear (NT), produzidos por fecundação in vitro (FIV), ou por monta natural (MN). Verificou-se um decréscimo altamente significativo de expressão de VEGF nas placentas dos animais produzidos in vitro, quando comparados aos animais MN (1,32a; 0,21b; 0,31b, respectivamente para MN, FIV e NT, p<0,05; teste de Duncan), sugerindo...
Tipo: Artigo em periódico indexado (ALICE) Palavras-chave: Análise de expressão génica; Semiquantitativo; Placentas Bovinas; VEGF; Clone; RT-PCR.
Ano: 2006 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/256248
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Avaliação da influência da ovalbumina (OVA) como suplemento protéico durante a etapa de fecundação in vitro de oócitos bovinos. Repositório Alice
TETZNER, T. A. D.; SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; OLIVEIRA, C. S.; MELO, D. S.; MONTEIRO, F. M.; VANTINI, R.; GARCIA, J. M..
A produção in vitro (PIV) de embriões é considerada como a terceira geração de biotecnologias (THIBIER et aI., Biology ofthe Cell, v.75, p.173-] 80, ] 992). Das etapas da PIV, a fecundação é um processo complexo que resulta na união de dois gametas, promovendo a restauração do número de cromossomos para o começo do desenvolvimento de um novo indivíduo (GORDON, Cambridge University Press, p.30-]42, ]994). O presente trabalho objetivou avaliar os efeitos da OVA na etapa de fecundação in vitro (FIV). Os oócitos foram maturados in vitro (MIV) em meio TCM ]99 com sais de Earle, suplementado de acordo com os tratamentos: SFB (]O% SFB; Crypionlll), BSA (Inlablll; 4mg/mL BSA), OVA (]nlablll; 4mg/mL OVA), e ],OI.1g/mL de FSH (Plusetlll, Calier), 501.1g/mL de hCG...
Tipo: Resumo em anais de congresso (ALICE) Palavras-chave: Embriões; Bovinos; Produção; Ovalbumina.
Ano: 2007 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/48088
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Avaliação da qualidade em embriões PIV com a substituição do soro fetal bovino e da albumina sérica bovina pela ovalbumina. Repositório Alice
TETZNER, T. A. D.; SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; FERRERIA, C. R.; NICIURA, S. C. M.; OLIVEIRA, C. MELO, D. S.; MELO, D. S.; MONTEIRO, F. M.; VANTINI, R.; GARCIA, J. M..
2008
Tipo: Resumo em anais de congresso (ALICE) Palavras-chave: Embriões; Qualidade; Albumina sérica.
Ano: 2008 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/48294
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Desenvolvimento embrionário, visualização de pronúcleos e transferência pronuclear após centrifugação de zigotos bovinos em meio com citocalasina. Infoteca-e
NICIURA, S. C. M.; FERREIRA, C. R.; PERECIN, F.; YAMAZAKI, W.; LEAL, C. L. M.; GARCIA, J. M.; MEIRELLES, F. V..
2007
Tipo: Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento (INFOTECA-E) Palavras-chave: Desenvolvimento embrionário - Pronúcleos - Zigotos; Bovinos; Citocalasina; Bovino; Embriogenese; Nucleo; Fecundacao animal.
Ano: 2007 URL: http://www.infoteca.cnptia.embrapa.br/handle/doc/37496
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Efeito do protocolo de sincronização celular na produção de clones bovinos. Repositório Alice
PERECIN, F.; YAMAZAKI, W.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; BIASE, F. H.; MERIGHE, G. K. F.; SARAIVA, N. Z.; TETZNER, T. A. D.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M..
Os métodos de sincronização da célula doadora de núcleo para uso em clonagem baseiam-se no bloqueio reverslvel do ciclo celular em pontos especlficos. Idealmente, espera-se que esse bloqueio não provoque prejulzo à viabilidade do embrião reconstituldo após a transferência de núcleo. Este trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência do processo de clonagem (taxa de eletrofusão, produção de blastocistos e estabelecimento de prenhez) a partir de dois protocolos de sincronização celular: privação de soro fetal bovino (SFB) ou cultivo celular até confluência. Oócitos bovinos foram recuperados por aspiração folicular postmortem e maturados in vitro (MIV) por 18h em TCM-199 suplementado com 10% de SFB, 1 ug/mL FSH, 50ug/ mL hCG, 1 ug/mL estradiol, 0,2mM...
Tipo: Resumo em anais de congresso (ALICE) Palavras-chave: Efeito do protocolo; Sincronização celular; Produção de clones bovinos.
Ano: 2007 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/48092
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Efeitos da demecolcina sobre a cinética da maturação nuclear e a migração dos grânulos corticais em oócitos bovinos. Repositório Alice
SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; MÉO, S. C.; FERREIRA, C. R.; TETZNER, T. A. D.; VANTINI, R.; GARCIA, J. M..
A demecolcina é um agente anti-mitótico desestruturador de microtúbulos utilizado para enucleação química de oócitos destinados à transferência nuclear (TN). O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da exposição de oócitos bovinos à demecolcina sobre a maturação nuclear e a distribuição de grânulos corticais (GC), utilizada como indício de maturação citoplasmática. Oócitos bovinos maturados in vitro (MIV) em TCM 199 suplementado com 10% SFB, 1,0µg/mL de FSH, 50µg/mL de hCG, 1,0µg/mL de estradiol, 0,20mM de piruvato e 83,4µg/mL de amicacina, durante 24 horas receberam tratamento com demecolcina nas concentrações: 0 (controle) e 0,05ìg/mL (tratado). O grupo tratado foi exposto à demecolcina a partir de 12 horas de MIV e avaliado quanto à maturação...
Tipo: Resumo em anais de congresso (ALICE) Palavras-chave: Oócitos bovinos; Grânulos corticais; Efeitos da demecolcina; Cinética; Maturação nuclear.
Ano: 2007 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/48118
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Efeitos da redução ou substituição do soro fetal bovino por outros compostos na maturação in vitro de oócitos bovinos. Repositório Alice
DEL COLLADO, M.; SARAIVA, N. Z.; LOPES, F. L.; CRUZ, M. H.; GASPAR, R. C.; OLIVEIRA, C. S.; PERECIN, F.; GARCIA, J. M..
A utilização do soro fetal bovino (SFB), embora bastante disseminada na produção in vitro (PIV) de embriões bovinos, apresenta limitações por ser um meio indefinido e por causar efeitos que prejudicam a qualidade desses embriões. Por esse motivo, nos últimos anos, grande parte das pesquisas relacionadas à PIV está voltada para a substituição do SFB por outros compostos nos meios de cultura. No presente estudo, foram utilizados como compostos protéicos a albumina sérica bovina livre de ácidos graxos (BSA-FAF) e um produto comercial denominado fluido embriônico (FE) de maneira isolada ou em diferentes combinações e concentrações, com objetivo de substituir ou diminuir a concentração do SFB durante a maturação in vitro (MIV). Para isso, oócitos bovinos foram...
Tipo: Artigo em periódico indexado (ALICE) Palavras-chave: Oócitos bovinos; Maturação in vitro; Soro fetal bovino; Oocytes; In vitro maturation; Fetal calf serum; Cattle.
Ano: 2014 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/1003939
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Efeitos da substituição do soro fetal bovino (SFB) e da albumina sérica bovina (BSA) pela ovalbumina (OVA) na produção in vitro de embriões bovinos. Repositório Alice
TETZNER, T. A. D.; SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; OLIVEIRA, C. S.; MELO, D. S.; MONTEIRO, F. M.; VANTINI, R.; GARCIA, J. M..
As biotecnologias aplicadas à reprodução animal vêm causando grandes impactos à produção animal, principalmente nas últimas duas décadas. Historicamente, o meio de cultivo contém SFB ou BSA, que são preparados e purificados a partir de produtos derivados sangUíneos e apresentam altos riscos de contaminação por patógenos, como vírus: BHV-I e BVDV (GUERIN et ai., Buli Academic Veterinarian France, v.61, po513-520, 1988), e prions: BSE (KRISHER et ai., Biology of Reproduction, v.60, p.1345-1352, 1999). De acordo com Barlian et ai. (Cell Biology Intemational, v.17, p.677-684, 1993), a OVA é um suplemento protéico não aparentado ao BSA, mas que -possui a capacidade de manter a proliferação celular. Além disso, por ser de origem heteróloga, os riscos de...
Tipo: Resumo em anais de congresso (ALICE) Palavras-chave: Soro fetal bovino (SFB); Albumina sérica bovina (BSA); Ovalbumina (OVA); Produção in vitro; Embriões bovinos.
Ano: 2007 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/48089
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Expressão de DNA metiltransferases em blastocistos bovinos produzidos in vivo e in vitro. Repositório Alice
PERECIN, F.; YAMAZAKI, W.; FERREIRA, C. R.; MÉO, S. C.; BIASE, F. H.; MERIGHE, G. K. F.; SARAIVA, N. Z.; TETZNER, T. A. D.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M..
Nos mamiferos, a metilação do DNA é essencial na regulação da expressão gênica e na diferenciação celular. Uma proporção elevada de embriões produzidos por transferência nuclear (TN) é incapaz de estabelecer e sustentar a gestação a termo. Há grande consenso que alterações epigenéticas, primariamente causadas por alterações nos padrões de metilação do DNA, resultam em expressão gênica anormal em embriões e fetos clonados, tomando os indices de sucesso da clonagem frustrantes. Este trabalho objetivou analisar os padrões de expressão das DNA metiltransferases (DNMT) I, 3A e 3B em blastocistos bovinos produzidos in vivo (grupo IV) ou in vilro por FIV (grupo FlV) e transferência nuclear a partir de fibroblastos submetidos à privação de soro fetal bovino (SFB)...
Tipo: Resumo em anais de congresso (ALICE) Palavras-chave: Expressão de DNA; Metiltransferases; Blastocistos bovinos; Produzidos in vivo e in vitro.
Ano: 2007 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/48096
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Imprinted gene expression in in vivo- and in vitro-produced bovine embryos and chorio-allantoic membranes. Repositório Alice
PERECIN, F.; NICIURA, S. C. M.; FERREIRA, C. R.; MERIGHE, G. K. F.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M..
Cloning by nuclear transfer is often associated with poor results due to abnormal nuclear reprogramming of somatic donor cells and altered gene expression patterns. We investigated the expression patterns of imprinted genes IGF2 and IGF2R in 33- to 36-day bovine embryos and chorio-allantoic membranes derived from in vivo- and in vitro-produced embryos by somatic cell nuclear transfer (SCNT), parthenogenetic activation, and in vitro fertilization (IVF). There was a lower IGF2 expression rate in the SCNT (0.19) and parthenogenetic (0.02) groups when compared to in vivo and IVF embryos (2.01; P < 0.05). In the chorio-allantoic membranes, IGF2 showed a baseline expression pattern (P < 0.05) in parthenotes (0.001) when compared to in vivo, IVF (3.13), and...
Tipo: Artigo em periódico indexado (ALICE) Palavras-chave: Cattle; Epigenetics; Genomic imprinting; IGF2; IGF2R; Nuclear transfer.
Ano: 2009 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/256254
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Karyoplast exchange between strontium- and 6-DMAP-parthenogenetically activated zygotes of cattle. Repositório Alice
MEO, S. C.; FERREIRA, C. R.; PERECIN, F.; SARAIVA, N. Z.; TETZNER, T. A. D.; YAMAZAKI, W.; LEA, C. L. V.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M..
Ooplasmic factors drive nuclear organization after fertilization and are also important for re-programming in nuclear transfer procedures, in which artificial activation is essential for reconstructed embryos to progress in development. The present research evaluated the effect of pronuclear transfer (PT) between zygotes parthenogenetically activated with ionomycin followed by strontium (S) or 6-DMAP (D) on early embryonic development. PT was performed in the same zygote to obtain embryos in control groups (S-PT and D-PT) and between zygotes activated with S and D to achieve embryos with differentially activated cytoplasm (C) and nucleus (N) (SCDN and DCSN). PT procedure did not affect cleavage and blastocyst rates, respectively, in PT control groups...
Tipo: Artigo em periódico indexado (ALICE) Palavras-chave: Artificial activation; Bovine; Embryonic development; Pronuclear transfer; Beef cattle.
Ano: 2009 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/576277
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The effects of ovalbumin as a protein source during the in vitro production of bovine embryos. Repositório Alice
TETZNER, T. A. D.; SARAIVA, N. Z.; PERECIN, F.; NICIURA, S. C. M.; FERREIRA, C. R.; OLIVEIRA, C. S.; GARCIA, J. M..
Embryo quality is influenced by the culture conditions that affect in vitro maturation (IVM), fertilization (IVF) and culture (IVC) rates. The present study investigated the feasibility of producing bovine embryos after the replacement of fetal calf serum (FCS) and bovine serum albumin (BSA) by ovalbumin (OVA). The IVM and IVC medium were supplemented with 10% FCS, 4 mg/mL BSA, or 4 mg/mL OVA. The IVF medium was supplemented with 6 mg/mL BSA or OVA. For IVM, supplementation with FCS, BSA, and OVA did not affect nuclear maturation or cortical granule migration. Higher rates of formation of two pronuclei were obtained when FCS was employed for IVM (79.97%), regardless of the supplement used for IVF, and when BSA was used for IVF (59.4%), regardless of the...
Tipo: Artigo em periódico indexado (ALICE) Palavras-chave: Bovine embryo; In vitro culture; Ovalbumin; Protein source.
Ano: 2011 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/908631
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Troca de carioplastos entre zigotos ativados com estrôncio ou 6-DMAP. Repositório Alice
NICIURA, S. C. M.; FERREIRA, C. R.; PERECIN, F.; SARAIVA, N. Z.; TETZNER, T. A. D.; BORGES, J. C.; YAMAZAKI, W.; LEAL, C. L. V.; MEIRELLES, F. V.; GARCIA, J. M..
A ativação oocitária constitui importante etapa dos procedimentos de transferência nuclear e injeção espermática intracitoplasmática. Dessa maneira, toma-se necessária a busca por tratamentos de ativação eficientes e que promovam o efeito mais semelhante possivel ao desencadeado pelo espermatozóide. Neste trabalho, avaliamos o efeito da troca de carioplasto entre zigotos produzidos por dois tratamentos de ativação diferentes sobre o desenvolvimento embrionário inicial. Para tanto, oócitos bovinos foram maturados in vitro por 24h em TCM 199 com 10% de SFB, 1 ug/mL de FSH, 50ug/mL de hCG e 1 ug/ mL de estradiol, desnudados com hialuronidase (0,5% por 5min) e ativados com ionomicina (5~M por 5min) seguida de estrôncio (20mM SrCI2 e 1 O~g/mL de citocalasina D,...
Tipo: Resumo em anais de congresso (ALICE) Palavras-chave: Transferência nuclear; Ativação oocitária.
Ano: 2007 URL: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/48359
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